[发明专利]一种对含有GFP基因的表达载体进行构建的方法在审
| 申请号： | 201310534817.2 | 申请日： | 2013-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN103614402A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 刘军 | 申请（专利权）人： | 刘军 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 116000 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 含有 gfp 基因 表达 载体 进行 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种对含有GFP基因的表达载体进行构建的方法，其特征在于，步骤如下：首先，酶切质粒，具体为单酶切质粒，在35-36摄氏度的恒温下进行水浴，时间至少为2小时，最多5小时；用百分比不超过百分之一点五的琼脂糖凝胶电泳进行检测，胶回收线性化比较大的片对，然后对其进行末端补平；末端补平：即将回收的部分混合，然后用离心机进行甩干离心，65摄氏度的条件下进行温育，时间不少于十分钟；用无水乙醇，在零下二十度的环境下进行预冷后，放置至少30分钟；告诉离心；弃掉上清；使用TE溶解上述步骤产生的沉淀；单酶切质粒，点用检测并胶回收片段，即构建所需质粒。
2.如权利要求1所述的一种对含有GFP基因的表达载体进行构建的方法，其特征在于, 所述无水乙醇，需要为补平后体积的3-4倍，之前需要放置在室温下进行静置。
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