[发明专利]将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离有效
申请号: | 201310530972.7 | 申请日: | 2013-10-31 |
公开(公告)号: | CN103555662A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | 于建香;帅志强;苏冠宇;武光明;姚天宇 | 申请(专利权)人: | 大连金弘基种畜有限公司;北京石油化工学院 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076;G01N15/14 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 116105 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 将四溴化 乙基 乙氧基 胺基 苯乙烯 应用于 精子 分离 | ||
1.将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,包括下列步骤:
向待分离的精液中加入荧光染料和染色用工作液,再孵育,得到混合液,其中,所述荧光染料为四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯,并且所述待分离的精液中每含4亿个精子时,至少加入7μg所述荧光染料;
采用流式细胞仪对所述混合液进行分离,得到分离的X精子和Y精子。
2.根据权利要求1所述的将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,所述孵育的时间为:
40-50min。
3.根据权利要求1所述的将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,所述待分离的精液为:活力≥0.6,密度≥10亿/mL的精液。
4.根据权利要求1所述的将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,所述孵育的步骤之后和所述分离的步骤之前还包括:
向所述混合液中加入蛋黄工作液。
5.根据权利要求1所述的将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,所述向待分离的精液中加入荧光染料和染色用工作液的步骤之前还包括:
向所述待分离的精液中加入抗生素。
6.根据权利要求1所述的将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,所述向待分离的精液中加入荧光染料和染色用工作液的步骤之前还包括:
在30-35℃下将所述荧光染料和所述染色用工作液预热。
7.根据权利要求4所述的将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,所述向所述混合液中加入蛋黄工作液的步骤之前还包括:
在30-35℃下将所述蛋黄工作液预热。
8.根据权利要求1所述的将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,所述向待分离的精液中加入荧光染料和染色用工作液的步骤之前还包括:
用孔径为45-55μm的过滤器过滤所述待分离的精液。
9.根据权利要求4所述的将四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯应用于精子分离,其特征在于,所述向所述混合液中加入蛋黄工作液的步骤之后和所述分离的步骤之前还包括:
用孔径为45-55μm的过滤器过滤混合液。
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