[发明专利]一种α-芋螺毒素MI的全固相合成方法

权利要求书

1.一种α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）按照固相合成的方法，Fmoc氨基树脂在Fmoc脱保护试剂作用下反应脱去Fmoc后，在偶联体系作用下于偶联溶剂中从C端到N端依次依肽序依次连接Fmoc氨基酸，合成十四肽氨基树脂，所述十四肽树脂为PG-Gly-Arg-Cys(X₂)-Cys(X₁)-His-Pro-Ala-Cys(X₂)-Gly-Lys-Asn-Tyr-Ser-Cys(X₁)-氨基树脂，或为PG-Gly-Arg-Cys(X₁)-Cys(X₂)-His-Pro-Ala-Cys(X₁)-Gly-Lys-Asn-Tyr-Ser-Cys(X₂)-氨基树脂；其中，PG为Fmoc或Boc，X₁为Trt或Mmt，X₂为Acm；

（2）在氧化体系的作用下，十四肽氨基树脂反应脱除X₁和X₂；

（3）步骤（2）产物在脱除N端保护基后，在裂解体系作用下裂解脱除侧链保护基，即得α-芋螺毒素MI。

2.权利要求1所述的一种α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步骤（1）中，所述Fmoc氨基树脂为Rink Amide树脂、Rink Amide AM树脂、Rink Amide MBHA树脂、Rink Amide PEGA树脂或PAL树脂。

3.权利要求1所述的一种α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步骤（1）中，Fmoc脱保护试剂为哌啶，脱保护反应温度为10-30℃，反应时间为5-60min。

4.权利要求1所述的一种α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步骤（1）中，偶联溶剂选自DCM、DMF和NMP中的任意一个或一个以上的组合；偶联体系选自HOBt、HOAt、HOOBt和Cl-HOBt中的任意一个或多个与DIC的组合，或选自HOBt、HOAt、HOOBt和Cl-HOBt中的任意一个或多个、DPIEA或NMM中的任意一个或两个以及HBTU、HATU、PyBOP和PyAOP中的任意一个或多个的组合；偶联溶剂与Fmoc脱保护试剂的体积比为（1-5）:1。

5.权利要求1所述的一种α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步骤（2）中，所述氧化体系为碘的混合溶剂溶液，其中混合溶剂为体积比为（1-8）:1的二氧六环和甲醇的混合溶液，或为体积比为（1-8）:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶液，或为体积比为（1-8）:1的2,2,2-三氟乙醇和二氯甲烷的混合溶液，或为体积比为（1-8）:49的N-甲基吡咯烷酮和苯甲醚的混合溶液，或为体积比为（1-8）:1的2,2,2-三氟乙醇和氯仿的混合溶液，或为体积比为（1-8）:1的六氟异丙醇和氯仿的混合溶液；其中，碘和十四肽氨基树脂的摩尔比为（5-20）：1；反应温度为室温，反应时间为1-3h。

6.权利要求1所述的一种α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步骤（3）中，裂解体系为体积比为(80-96)：(1-5)：(1-5)：(1-5)：(1-5)的TFA、苯甲硫醚、三异丙基硅烷、苯甲醚和水；反应温度为室温，反应时间为1-4h。