[发明专利]贞芪扶正制剂中熊果酸的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种贞芪扶正制剂中熊果酸的含量测定方法，属于中药技术领域。 

背景技术

贞芪制剂具有补气养阴、扶正固本之功效。现代药理实验证明贞芪制剂能提高人体免疫功能，保护骨髓和肾上腺皮质，促进干扰素产生；此外，还可以配合肿瘤患者放、化疗使用，减轻病人放、化疗期间的毒副作用，促进正常功能的恢复。贞芪制剂的处方由黄芪和女贞子组成。发明专利200310122216.7公开的《贞芪扶正药制备方法改进》可将药材女贞子中的齐墩果酸、熊果酸等有效成分充分提出。 

贞芪制剂中所包含的熊果酸具有提高免疫的功效，同时熊果酸还能抑制肉瘤生长，是女贞子抗消化系肿瘤的活性成分。另外，熊果酸还具有明显的安全与降温作用，能显著降低大鼠的正常体温、减少小鼠活动，协同戊巴比妥的睡眠和抗戊四唑的惊厥作用等。因此，对贞芪扶正制剂中熊果酸的含量进行测定显得尤为重要，是衡量药品有效性的一个关键指标。 

专利号为200710077983.9、名称为《一种用于久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控方法》的专利中公开了一种贞芪扶正制剂中熊果酸的鉴别方法，但是其并未公开如何对贞芪扶正制剂中的熊果酸进行含量测定，因而并不能形成一套严格可靠的质量检测标准。如果没有严格的质量标准，得到的产品不能确保其质量，结果必将影响该药物的临床疗效；所以为提高贞芪扶正药物的治疗作用，确保用药的安全、有效及产品质量的稳定，制定一个严格可靠的质量标准成为保证药品质量的基本要求。 

发明内容

本发明的目的在于，提供一种贞芪扶正制剂中熊果酸的含量测定方法，它可以有效解决现有技术中存在的问题，实现对贞芪扶正制剂中熊果酸成分的含量进行快速、准确、高重现性、高回收率的测定。 

本发明所述的贞芪扶正制剂按照发明专利200310122216.7所述的方法制备。 

为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：贞芪扶正制剂中熊果酸的含量测定方法，以熊果酸对照品为对照，采用高效液相色谱法在200～220nm波长处测定贞芪扶正制剂中熊果酸的含量。 

具体的，以熊果酸对照品为对照，以乙腈∶甲醇∶0.01%～0.5%醋酸铵=60～70∶10～15∶30～15或0.01～0.1mol/L磷酸二氢钠∶乙腈=15～35为流动相，采用高效液相色谱法在200～220nm波长处测定贞芪扶正制剂中熊果酸的含量。 

更具体的含量测定方法为： 

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈∶甲醇∶0.01%～0.5%醋酸铵=60～70∶10～15∶30～15或0.01～0.1mol/L磷酸二氢钠∶乙腈=15～35为流动相；流速0.5～1.5mL·min^-1；检测波长200～220nm；柱温20～40；℃理论板数以熊果酸峰计算应不低于1000； 

（2）对照品溶液的制备：精密称取熊果酸对照品适量，加甲醇溶解，制成1mg/mL的熊果酸对照品溶液； 

（3）供试品溶液的制备：精密称取贞芪扶正制剂或其内容物14g，精密加入甲醇100mL，称定重量，超声或回流提取30～60min，或者，微波提取2～10min，用甲醇补足重量，过滤；取续滤液，即为供试品溶液； 

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。 

前述方法中，所述检测波长优选为210nm。 

前述方法中，所述的流动相优选为乙腈∶甲醇∶0.5%醋酸铵=67:12:21(v/v)或0.04mol/L磷酸二氢钠∶乙腈=20。∶80 

前述方法中，所述的流速优选为0.8～1.0mL·min^-1。 

前述方法中，所述的柱温优选为25。℃ 

采用本发明所述的贞芪扶正制剂中熊果酸的含量测定方法，贞芪扶正制剂中所含的熊果酸C₃₁H₄₂O₁₇不得少于0.1%。 

为确保本发明含量测定方法的科学、合理、可行，发明人进行了一系列的试验研究和考察。 

一、仪器与试药（见表1） 

表1 

注：水为蒸馏水，其它试剂均为分析纯。 

二、方法与结果 

1、色谱条件的选择 

1.1柱温的考察 

为了筛选最佳柱温，发明人采用不同的柱温进行实验研究，结果见表2：