[发明专利]一种高产型乌肤鸡品系的培育方法

权利要求书

1.一种高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）利用乌肤鸡品种作为父本与高产蛋鸡品种作为母本进行杂交，生产出F1代鸡；

（2）F1代自交得到F2代，选留F2代乌肤鸡；

（3）利用荧光定量PCR测定F2代乌肤鸡EDN3基因的相对拷贝数，确定F2代乌肤鸡个体的基因型，选留乌肤位点为FmFm基因型的个体，淘汰乌肤位点为Fmfm基因型的个体；

（4）对得到的FmFm基因型个体进行横交和扩繁，按照家系选择和个体选择方法，提高产蛋量，同时提纯和固定乌肤性状，经过4个世代以上的选育后，得到乌肤位点为FmFm基因型的高产型乌肤鸡品系。

2.根据权利要求1所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：所述步骤（1）中的乌肤鸡品种为丝羽乌骨鸡、江山乌骨鸡、金湖乌凤鸡、余干乌骨鸡、郧阳乌骨鸡、雪峰乌骨鸡、四川山地乌骨鸡、乌蒙乌骨鸡、腾冲雪鸡、略阳鸡、他留乌骨鸡、无量山乌骨鸡或盐津乌骨鸡。

3.根据权利要求1所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：所述步骤（1）中的高产蛋鸡品种为白来航、罗曼、海兰、海赛克斯、尼克、巴布考克、黑康、特佳、雪佛、伊莎、京红、京粉、河北大午、农大3号、新杨褐或新杨白。

4.根据权利要求1所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：所述步骤（3）中利用荧光定量PCR测定F2代乌肤鸡EDN3基因的相对拷贝数，确定F2代乌肤鸡个体基因型的方法，包括以下步骤：以包含EDN3基因的待测鸡全血基因组DNA为模板，以引物对P为引物进行荧光定量PCR扩增，扩增片段的DNA序列如SEQ ID No.3所示；

所述的引物对P为：

上游引物P-F：5’-CTTGACTTTTGGGATTTACCT-3’，

下游引物P-R：5’-ACTGGTGCAGTATTTTCTGTT-3’。

5.根据权利要求4所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：所述的荧光定量PCR扩增反应体系为：荧光定量PCR2×缓冲液10μL，ddH₂O7μL，P-F0.5μL，P-R0.5μL，DNA模板2μL。

6.根据权利要求4所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：所述的荧光定量PCR扩增反应程序为：95℃预变性2min；40个循环：95℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸30s；72℃延伸10min；20℃保存。

7.根据权利要求4所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：所述步骤（3）中利用荧光定量PCR测定F2代乌肤鸡EDN3基因的相对拷贝数，确定F2代乌肤鸡个体基因型的方法，还包括以下步骤：利用标准曲线求得待测鸡EDN3基因的相对拷贝数，根据其相对拷贝数鉴定鸡乌肤位点的基因型。

8.根据权利要求7所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：所述的利用标准曲线求得待测鸡EDN3基因的相对拷贝数的方法为：荧光定量PCR扩增前，先将待测鸡的DNA稀释到同一浓度10ng/μL，将待测鸡的Ct值代入标准曲线方程中，求出其对应的对数浓度，再转化为浓度，即为该待测鸡EDN3基因的相对拷贝数。

9.根据权利要求7所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：所述的根据其相对拷贝数鉴定鸡乌肤位点的基因型的方法为：当待测鸡EDN3基因的相对拷贝数为2时，该个体为乌肤纯合子；当待测鸡EDN3基因的相对拷贝数为1.5时，该个体为乌肤杂合子。

10.根据权利要求1所述的高产型乌肤鸡品系的培育方法，其特征在于：将步骤（4）得到的乌肤位点为FmFm基因型的高产型乌肤鸡作为父本与高产蛋鸡品种杂交配套，生产出更高生产性能的乌肤鸡。