[发明专利]一株发酵甘蔗糖蜜生产D-乳酸菌株及其发酵方法

权利要求书

1.一株发酵甘蔗糖蜜生产高光学纯度D-乳酸的德式乳杆菌菌株，其特征在于所述菌株为德式乳杆菌Lactobacillus delbrueckii LACD01，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心中科院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.8324。

2.利用德式乳杆菌Lactobacillus delbrueckii LACD01发酵甘蔗糖蜜生产D-乳酸的方法，其特征是步骤如下：

（1）平板培养：将德式乳杆菌Lactobacillus delbrueckii LACD01接种至平板培养基，将平板密封并至于恒温培养箱中，培养温度35～45℃，培养时间为30～40h；

（2）种子培养：挑取（1）中平板培养的德式乳杆菌Lactobacillus delbrueckii LACD01单菌落，接种至装有5～10mL种子培养基的试管中静置培养，培养温度35～45℃，培养时间为20～30h，制成第一批种子液，将试管中第一批种子液按体积比1～3：100接入装有相应体积种子培养基的锥形瓶中静置培养，培养温度35～45℃，培养时间为20～30h，制成第二批种子液；

（3）发酵甘蔗糖蜜产D-乳酸：将试管中第二批种子液按体积比10～15：100接入到装有相应体积发酵培养基的发酵罐中，于35～45℃下发酵50～70h，发酵开始时加入50～70g/L的碳酸钙作为中和剂使发酵体系pH控制在5.3～5.8之间，发酵过程中不通气，搅拌速度为100～150rpm。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的平板培养基配方为：以蒸馏水为溶剂，其中含牛肉膏10～20g/L，酵母粉10～20g/L，葡萄糖10～20g/L，乙酸钠5～10g/L，柠檬酸二胺1～3g/L，磷酸氢二钾1～3g/L，硫酸镁0.1～0.3g/L，硫酸锰0.05～0.2g/L，碳酸钙10～20g/L，琼脂15～20g/L，pH5.5～6.5，按上述配方配制好溶液后，110～115℃灭菌20～30min，冷却至25～30℃后备用。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的种子培养基配方为：以蒸馏水为溶剂，其中含牛肉膏10～20g/L，酵母粉10～20g/L，葡萄糖10～20g/L，糖蜜总糖浓度10～20g/L，乙酸钠5～10g/L，柠檬酸二胺1～2g/L，磷酸氢二钾1～2g/L，硫酸镁0.1～0.2g/L，硫酸锰0.05～0.1g/L，pH5.5～6.5，按上述配方配制好溶液后，110～115℃灭菌20～30min，冷却至25～30℃后备用。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的发酵培养基配方为：以蒸馏水为溶剂，其中含牛肉膏30～60g/L，糖蜜总糖浓度70～120g/L，乙酸钠5～10g/L，柠檬酸二胺1～2g/L，磷酸氢二钾1～2g/L，pH5.5～6.5，按上述配方配制好溶液后，110～115℃灭菌20～30min，冷却至35～45℃后备用。