[发明专利]IL-17F基因实时荧光PCR检测引物及试剂盒有效
申请号: | 201310504426.6 | 申请日: | 2013-10-24 |
公开(公告)号: | CN103498007A | 公开(公告)日: | 2014-01-08 |
发明(设计)人: | 周世亮 | 申请(专利权)人: | 周世亮 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 彭成 |
地址: | 250031 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | il 17 基因 实时 荧光 pcr 检测 引物 试剂盒 | ||
1.IL-17F基因实时荧光PCR检测引物,其特征是:所述的正反引物如下:
正向引物(SEQ ID NO.1):5-CTGGGACGTACCGGGTCGGT-3,
反向引物(SEQ IN NO.2):5-GTCTGTCGCCTGAACAACGTCT-3。
2.IL-17F基因实时荧光PCR检测试剂盒,其特征是:其包括一种混合试剂,所述的混合试剂包括:SYBR Premix Ex Taq II(2×)、、正向引物10μM、反向引物10μM;
所述的正向引物和反向引物为权利要求1所述的引物。
3.IL-17F基因实时荧光PCR检测方法,其特征是,具体步骤为:
1)提取RNA,并反转录为cDNA;
2)反应体系:取2μl 步骤1)制得的模板cDNA 溶液,加入权利要2所述的试剂盒中的溶液11.2μl,再加入灭菌超纯水至总体积20μl ;将以上各组分加入至0.2mL 实时荧光PCR 反应管中,短暂离心;
3)实时荧光PCR 检测,具体反应提交如下:
95℃ /10s,1 次循环;95℃ /50s,66℃ /60s,35 次循环。
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