[发明专利]一种替诺福韦前药的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种新型替诺福韦前药的纯化方法。

背景技术

替诺福韦（tenofovir）是一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂，可有效对抗多种病毒，用于治疗诸如乙型肝炎病毒等病毒感染性疾病。由于替诺福韦在生理pH条件下为双负离子的膦酸基团，故替诺福韦不易透过细胞膜吸收，生物利用度很低，并且还存在剂量依赖性肾毒性，限制了其治疗作用，因此必须通过酯化、成盐等手段制成膦酸酯前药才能用于临床。例如，富马酸替诺福韦酯（Tenofovir disoproxil fumarate）是吉里德科学公司（Gilead Science）研发的第一代口服有效的替诺福韦前药，用于治疗艾滋病感染和乙型肝炎。

由于富马酸替诺福韦酯对于血清酶介导的水解反应高度敏感，不能有效增加作用部位药物浓度，同时在代谢过程释放两当量的具有潜在毒性的甲醛，在临床治疗过程中发现乳酸性酸中毒，严重的肝肿大，以及脂肪代谢障碍等副作用。为了提高替诺福韦前药在血浆中的稳定性，降低其代谢产物-替诺福韦在血浆中的浓度从而降低药物毒性，吉里德公司研发了如式V所示的替诺福韦磷酰胺酯前药（GS-7340），并公开了GS-7340的制备方法（WO2002008241）。

在研究GS-7340的基础上，中国专利申请2012100041647.4报道了一种如式I所示的新型替诺福韦前药，与GS-7340相比，该新型前药在血液中更加稳定，并且在外周血单核细胞（PBMCs）中活性代谢物替诺福韦的浓度更高，从而有可能是一种疗效更好、毒副作用更小的新型替诺福韦前药。

在制备如式I所示的化合物时，由于反应过程中产生一个磷手性中心，从而得到如式I和II所示的两个化合物的混合物。如式I所示的化合物和如式II所示的化合物为非对映异构体，用一般重结晶方法很难实现如式I所示化合物的分离纯化，用制备液相可以实现这两个化合物的分离而得到如式I所示的化合物，但是该方法操作繁琐，且费用很高，不适用于大规模制备，中国专利申请2012100041647.4报道了该分离纯化方法。

发明内容

发明人经过反复研究，成功地利用成盐析晶的方法实现对如式I所示的化合物和如式II所示的化合物的混合物进行分离纯化，从而制得95%以上纯度的如式I所示的化合物。

本发明提供了一种如式I所示的化合物的纯化方法，

该方法在如式I所示的化合物和如式II所示的化合物的混合物中加入D-(+)-二苯甲酰酒石酸成盐，经过一次或多次结晶后分离，再经过碱中和后得到如式I所示的化合物。

在本发明的一个具体实施方案中，提供的纯化方法包括以下步骤：

1）在如式I所示的化合物和如式II所示的化合物的混合物中加入D-(+)-二苯甲酰酒石酸成盐，

2）经过一次或多次结晶后分离得到如式I所示的化合物的D-(+)-二苯甲酰酒石酸盐，

3）所得到的如式I所示的化合物的D-(+)-二苯甲酰酒石酸盐经过碱中和后得到如式I所示的化合物。

本发明还提供了一种如式III所示的盐及其制备方法，其制备方法包括以下步骤：

1）在乙酸乙酯和正庚烷的混合溶剂中，化合物I和D-(+)-二苯甲酰酒石酸以1:1的摩尔比混合成盐，

2）在20℃下析晶，过滤，干燥后制得，

本发明还提供了一种如式IV所示的盐及其制备方法，其制备方法包括以下步骤：

1）在乙酸乙酯和正庚烷的混合溶剂中，化合物I和D-(+)-二苯甲酰酒石酸以2:1的摩尔比混合成盐，

2）在20℃下析晶，过滤，干燥后制得，

如式I所示的化合物和如式II所示的化合物的混合物通过中国专利申请2012100041647.4中描述的制备方法得到。

具体实施方式

以下将结合具体实施例详细地解释本发明，使得本领域技术人员更全面地理解本专利，具体实施例仅用于说明本发明的技术方案，并不以任何方式限定本发明。

实施例1（如式I、II所示的化合物的混合物的制备，引自中国专利申请2012100041647.4）

步骤1：