[发明专利]一种用于检测血清中酸性糖蛋白含量的试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于医学免疫体外诊断领域，涉及一种免疫透射比浊检测试剂盒，特别是涉及一种用免疫透射比浊法检测血清中α1-酸性糖蛋白含量的试剂盒。

背景技术

α1-酸性糖蛋白(α1-acid glycoprotein，α1-AGP，AAP)，分子量约40000，是一种非特异性急性时相反应蛋白(acute phase protein，APP)，也是人类血清中含糖量最多(含糖约45％)、酸性最强(PI为2.7～3.5)糖蛋白。主要由肝脏巨噬细胞和粒细胞产生，癌细胞也可合成。它与C反应蛋白一起被认为是反映炎症活动活急性状态的敏感指标。正常人血清AAP的值为450-950mg/L。在某些疾病中，特别是自身免疫性疾病中，其值升高很大。

α1-酸性糖蛋白是目前较为敏感的急性期反应的炎症标志物，是急性时相反应物之一。其对炎症、感染反应早于体温及白细胞数的变化，故广泛用于临床：(1)α1-酸性糖蛋白含量升高：病理情况下，白介素1刺激吞噬细胞释放出脂多聚糖，可促进α1-酸性糖蛋白的合成使血中水平升高，故α1-酸性糖蛋白是一种最稳定的早期呈阳性的急性时相反应物。如感染(炎症)、外伤、烧伤、手术、急性心肌梗死时α1-酸性糖蛋白含量升高。另外类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、克隆病、恶性肿瘤也增高，在癌转移时升高更明显。(2)α1-酸性糖蛋白浓度降低：肝细胞病变晚期、肾病综合症或其他原因所致尿中滤过的蛋白质量丢失、遗传因素和营养不良等疾病。

现有技术中常用的α1-酸性糖蛋白检测方法是放射免疫分析法、酶联免疫法。这些技术存在诸多不足，如需要特殊的设备，样本需要预处理，不能上全自动生化分析仪进行批量检测分析等。放射免疫分析存在放射线辐射和污染等问题。酶联免疫法应用比较普遍，但该方法为非均相免疫检测系统，测定过程较为繁琐，耗时长，缺少单位测试运行时间；自动化程度不高，批间差和重复性相对较大；需要配备多种专门设备，一定程度上增加了成本。

随着样本检验数量的不断增加，临床上迫切需要一种更为简便、快捷的方法来进行规模化批量操作。免疫比浊法检测α1-酸性糖蛋白可直接在全自动生化分析仪上完成批量样本分析，操作简单、可实现快速、高通量样本的检测。另外，为了提高试剂稳定性，特别添加了一种稳定剂用于改善试剂性能，可以保存更长时间。

发明内容

针对现有技术存在的缺点与不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种用于检测血清中酸性糖蛋白含量的试剂盒，操作简单、重复性好、能够进行批量样本全自动化检测的免疫透射比浊法检测α1-酸性糖蛋白的试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是，一种用于检测血清中酸性糖蛋白含量的试剂盒，该试剂盒包括试剂R1、试剂R2和校准品，所述试剂R1包含如下组分：缓冲液，浓度为10～500mM，pH范围是5.5～9.0；表面活性剂，浓度为0.5～5g/L；电解质，浓度为5～50g/L；高分子促进剂，浓度为2～100g/L；防腐剂，浓度为1～10g/L；所述试剂R2包含如下组分：缓冲液，浓度为10～500mM，缓冲液的pH范围是5.5～9.0；抗人α1-酸性糖蛋白抗体，浓度为10～30％(w／v)；电解质，浓度为5～50g/L；防腐剂，浓度为1～10g/L；稳定剂，浓度为5～50g/L；所述校准品包含如下组分：α1-酸性糖蛋白抗原，浓度为0.05～5.0g/L；稳定剂，浓度为5～50g/L；防腐剂，浓度为1～10g/L。

上述的一种用于检测血清中酸性糖蛋白含量的试剂盒，所述的缓冲液为TRIS缓冲液；所述的抗人α1-酸性糖蛋白抗体选自兔抗人或羊抗人抗体，抗体种类为多克隆抗体或单克隆抗体，抗体浓度为10～30％(w／v)；所述的电解质为氯化钠；所述的高分子促进剂为聚乙二醇(PEG)，分子量为6000～10000；所述表面活性剂选自Tween系列；所述防腐剂为叠氮钠；所述稳定剂选自海藻糖、蔗糖和牛血清蛋白中的一种或几种。

上述的一种用于检测血清中酸性糖蛋白含量的试剂盒，所述的缓冲液优选TRIS缓冲液，缓冲液浓度优选20～100mM，缓冲液的pH值范围优选7.0～8.0；所述的抗人α1-酸性糖蛋白抗体优选兔抗人α1-酸性糖蛋白多克隆抗体，抗体浓度优选12～20％(w／v)；所述的电解质为氯化钠，电解质浓度优选5～15g/L；所述的高分子促进剂优选PEG6000，浓度优选50～100g/L；所述的表面活性剂优选Tween20，浓度优选1～5g/L；所述的防腐剂优选叠氮钠，浓度优选1～5g/L；所述的稳定剂优选海藻糖，浓度为5～10g/L。