[发明专利]一种乳酸链球菌紫外诱变菌株及其用途

权利要求书

1.一种乳酸链球菌诱变菌株，命名为乳酸链球菌Lactococcus lactis JLZLSH1，该疫苗株已于2013年6月28日保藏在《中国典型培养物保藏中心》，保藏登记号为CCTCC NO.M 2013279。

2. 获得权利要求1所述乳酸链球菌菌株的方法，包括以下步骤完成：

1）将Lactococcus lactis AS1.2030，冻干粉末接入液体小试管培养基中进行活化后，转接至液体摇瓶培养基中，36℃恒温箱中培养8 h，连续传代3次后，接种新的种子液，接种量为3%（v/v），装液量为100 mL；将装有菌悬液的平皿放置在30 w紫外灯下15cm处，处理前先开灯预热20~30 min，稳定后开启磁力搅拌器，使菌悬液能接受均匀照射，启开培养皿盖，照射100 s后立即盖上皿盖；在红光下取诱变液l mL适当稀释，取100 μL涂布于乳链菌肽抗性梯度平板上，用黑布包裹好倒置培养于37 ℃培养箱24 h;

2）待平板上的菌落生长成熟后，挑选乳链菌肽高浓度区的菌落挑到小试管液体培养基中进行活化；装液量为100 mL摇瓶发酵培养；双层琼脂扩散法测定乳链菌肽效价；将乳链菌肽高产菌株挑选出来并立即制成甘油管保存；

3）将筛选获得的菌株在摇瓶中复苏，30℃、150 r/min恒温摇床中培养24 h，连续传代10次，测定每代的乳链菌肽效价。

3. 权利要求1所述的乳酸链球菌诱变菌株在食品、造纸、活性食品包装、农业饲料、生殖避孕和医学移植领域中的应用。