[发明专利]一种检测卡那霉素残留的适配体传感器的制备方法

权利要求书

1.一种检测卡那霉素残留的适配体传感器的制备方法，其特征在于：运用共价键和、自组装等技术构建适配体传感器用于检测卡那霉素抗生素，并且引入硫堇、石墨烯-聚苯胺、纳米金等材料，可以增强适配体传感器的电化学方面性能，利用卡那霉素适配体可以和卡那霉素特异性结合来定向固定卡那霉素，以更有效的完成目标成分卡那霉素的快速检测，石墨烯-聚苯胺纳米复合膜的制备步骤为：

（1）氧化石墨烯（GR）的制备：氧化石墨粉末被缓慢地加入到含有硝酸钠和高锰酸钾的硫酸溶液以及过氧化氢的混合物中，当没有气体产生时，在该混合物中加入过量的超纯水，将反应混合物过滤，并用HCl水溶液和超纯水洗涤，将滤液溶解在超纯水中，并通过过滤除去杂质，最后，将滤液离心30分钟，以除去残留的石墨，然后得到氧化石墨烯；(2) 石墨烯-聚苯胺纳米复合材料制备如下：0.3 mol/L的苯胺溶解在1 mol/L盐酸溶液中，氧化石墨烯被添加到上述混合液中超声处理1小时，然后，10 ml包含0.075 mol/L的过硫酸铵和1 mol/L的HCl溶液在剧烈搅拌下迅速加入到混合物中，苯胺的聚合反应开始后约5分钟，同时该混合物的颜色变为绿色，在室温（RT）下搅拌过夜后，将所得混合物用100ml超纯水稀释，并通过过滤收集，将所得的石墨烯-聚苯胺复合材料添加到含有0.1毫升肼的50ml超纯水中加热1小时（95℃），然后对复合材料进行过滤，重复用超纯水洗涤，以除去过量的肼，最后，所得到的复合材料被分散在10毫升的含有过硫酸铵（0.06克）的1 mol/L盐酸中，室温下搅拌过夜，通过过滤收集析出的聚合物，并用超纯水、乙醇和己烷重复洗涤，通过过滤收集所得的石墨烯-聚苯胺纳米复合材料。

2.如权利要求1所述的一种检测卡那霉素抗生素残留的适配体传感器的制备方法，其特征在于：聚苯胺的氨基端通过金氨键连接纳米金胶，利用硫堇、石墨烯-聚苯胺和纳米金胶三种纳米材料的协同作用共同修饰电极，显著的增强了电流响应，显著的增强了电流响应，且形成的金氨体系具有较高的稳定性和高度有序性，为适配体在电极表面的固定提供了一个良好的生物界面，扩大了电极的有效固定面积，提高了传感器表面适配体的有效固定量，且保持了适配体的生物活性，进而增大了检测精度和灵敏度，适配体传感器的制备步骤为：

在金电极（GE）上滴加6 μL的硫堇（TH），在室温条件下放置两个小时，得TH/GE，接着在THAu电极上滴加6 μL 2 mg/mL的石墨烯-聚苯胺复合物(Gr-PANI)，于室温下放置2h，接着电极自然晾干后，再滴加6 μL纳米金(AuNPs)溶液，在室温条件下放置两个小时自然晾干，然后在前述电极上滴加6 uL的5μM的适配体，在室温条件下放置两个小时自然晾干，接着在适配体晾干的基础上滴加6 μL 0.5% BSA溶液，室温下静置2h，以封闭非特异性结合位点，取出置于室温下晾干，适配体传感器制作完成，保存在4°C条件下备用。