[发明专利]观赏海棠花色苷的测定方法

权利要求书

1.一种观赏海棠花色苷的测定方法，其特征在于，包括：

步骤1，将经液氮速冻后的观赏海棠花叶片放入研钵中，加入石英砂和非溶性交联聚乙烯吡咯烷酮，加入液氮研磨成粉末；

步骤2，将所述粉末转入试管中，加入花色苷提取液，之后在45℃超声提取60min得到提取的花色苷提取液；

步骤3，将提取的所述花色苷提取液进行纯化处理，12000转/分钟离心3min，得到上清液装于安捷伦上样瓶中用于HPLC检测；

步骤4，上样，对所述安捷伦上样瓶进行HPLC-DAD检测，检测后得到观赏海棠花色苷的测定结果；所述HPLC-DAD检测的检测条件如下：柱温30℃；流速1mL/min；进样量20μL；流动相梯度，其中A为采用体积浓度为0.5%的甲酸水的流动相A；B为采用色谱纯乙腈的流动相B：0min10%B，40min19%B，50min40%B；柱子平衡时间10min；平衡：50.01min，10%，B，60min，10%B；检测波长：520nm；350nm；280nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1中，所述观赏海棠花叶片与石英砂的质量比为1：10；所述石英砂和非溶性交联聚乙烯吡咯烷酮的质量比为1：1。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2中，试管中的所述粉末与加入的所述花色苷提取液的质量比为0.1：5。

4.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤2加入到试管中的所述花色苷提取液由甲醇：水：甲酸按80：19：1的体积比构成。

5.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤3还包括：得到上清液后，将除上清液之外的滤液用0.22μm微孔滤膜进行过滤，并将剩余滤液于-80℃保存备用。