[发明专利]一种CRP/PCT联合诊断试纸及其制备方法

权利要求书

1.一种CRP/PCT联合诊断试纸，包括设于底板上且依次紧密相连的样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫，其特征在于，所述底板的中部纵向设有一防渗水胶条，所述防渗水胶条将样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫分隔为第一样品垫、第二样品垫、第一结合垫、第二结合垫、第一反应膜、第二反应膜、第一吸水垫和第二吸水垫；所述第一结合垫上固定有标记CRP抗体Ⅰ，所述第二结合垫上固定有标记PCT抗体Ⅰ，所述第一反应膜和第二反应膜均设有定量带和质控带。

2.根据权利要求1所述一种CRP/PCT联合诊断试纸，其特征在于，所述标记CRP抗体Ⅰ为量子点标记的CRP抗体Ⅰ，所述标记PCT抗体Ⅰ为量子点标记的PCT抗体Ⅰ；所述量子点标记的CRP抗体Ⅰ与量子点标记的PCT抗体Ⅰ具有不同的发射波长。

3.根据权利要求2所述一种CRP/PCT联合诊断试纸，其特征在于，所述第一反应膜上设有第一定量带和第一质控带，所述第一定量带固定有与标记CRP抗体Ⅰ具有不同抗原结合位点的CRP抗体Ⅱ，所述第一质控带固定有标记CRP抗体Ⅰ的二抗。

4.根据权利要求3所述一种CRP/PCT联合诊断试纸，其特征在于，所述第二反应膜上设有第二定量带和第二质控带，所述第二定量带固定有与标记PCT抗体Ⅰ具有不同抗原结合位点的PCT抗体Ⅱ，所述第一质控带固定有标记PCT抗体Ⅰ的二抗。

5.根据权利要求4所述一种CRP/PCT联合诊断试纸，其特征在于，所述定量带和质控带的间距为3-5mm。

6.根据权利要求5所述一种CRP/PCT联合诊断试纸，其特征在于，所述底板为黑色底板。

7.根据权利要求6所述一种CRP/PCT联合诊断试纸，其特征在于，所述试纸具有一个双插槽塑料卡，所述底板设于双插槽塑料卡内。

8.一种如权利要求1-6任一项所述CRP/PCT联合诊断试纸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、将具有不同发射波长的量子点标记的CRP抗体Ⅰ溶液和量子点标记的PCT抗体Ⅰ溶液分别喷涂于第一结合垫和第二结合垫上并在室温下晾干，于4℃下保存，备用；

所述量子点标记的CRP抗体Ⅰ/PCT抗体Ⅰ溶液为每100mL，1.5-2.5mg/mL的量子点标记的CRP抗体Ⅰ/PCT抗体Ⅰ中分别加入2-5g蔗糖、0.5-1g BSA、0.05-0.1g Tween的溶液；

b、用标记CRP抗体Ⅰ的二抗溶液在第一反应膜上画线并吹干形成第一质控线，用与标记CRP抗体Ⅰ具有不同抗原结合位点的CRP抗体Ⅱ溶液在第一反应膜上画线并吹干形成第一定量线；用标记PCT抗体Ⅰ的二抗溶液在第二反应膜上画线并吹干形成第二质控线，用与标记PCT抗体Ⅰ具有不同抗原结合位点的PCT抗体Ⅱ溶液在第二反应膜上画线并吹干形成第二定量线；备用；

c、将第一样品垫、第一结合垫、第一反应膜和第一吸水垫依次固定在防渗水胶条一侧的底板上并使之紧密搭接；将第二样品垫、第二结合垫、第二反应膜和第二吸水垫依次固定在防渗水胶条另一侧的底板上并使之紧密搭接；得CRP/PCT测试条。

9.根据权利要求8所述CRP/PCT联合诊断试纸的制备方法，其特征在于，将步骤c所得CRP/PCT测试条插入双插槽塑料卡内。

10.根据权利要求8所述CRP/PCT联合诊断试纸的制备方法，其特征在于，所述量子点标记的CRP抗体Ⅰ或PCT抗体Ⅰ由以下步骤制备：

a、用pH=7.2-7.5的磷酸盐缓冲液清洗羧基水溶性量子点，然后向其中加入EDC和NHS，所述EDC、NHS和量子点的摩尔比为20000-25000：5000:1，混合均匀后在23-25℃下反应50-70min得活化量子点；用pH=8.3-8.5的硼酸盐缓冲液清洗活化量子点至EDC、NHS和磷酸盐缓冲液除去，用pH=8.3-8.5硼酸盐缓冲液保存活化量子点，备用；

b、将经pH=8.3-8.5的硼酸盐缓冲液清洗后的CRP抗体Ⅰ或PCT抗体Ⅰ与步骤a所得活化量子点溶液混合均匀，所述活化量子点与CRP抗体Ⅰ或PCT抗体Ⅰ的摩尔比为1:8-10，在23-25℃下反应5-7h得反应液；反应液经排阻层析得量子点标记的CRP抗体Ⅰ或PCT抗体Ⅰ溶液。