[发明专利]一种高纯度兽药用绞股蓝总皂苷的制备方法

权利要求书

1.一种高纯度兽药用绞股蓝总皂苷的制备方法，其特征在于：步骤如下：

A、干燥：先将绞股蓝药材洗净、晾干，经过初步筛选后，将绞股蓝药材送入干燥机中，经50℃-65℃的热风连续动态干燥至股蓝药材的水分低于10%；

B、粉碎将干燥后的绞股蓝药材进行粉碎，粉碎至中粗粉，粉碎的目数为10目—50目，得到绞股蓝药材粉末；

C、浸泡：按照绞股蓝药材粉末与乙醇的1∶6--8 W/V的比例加入70%的乙醇，即绞股蓝药材粉末用70%的乙醇溶液浸润，使得总体的含醇量达70%，室温低于15℃±1℃，浸泡时间为3小时，室温高于16℃±1℃，浸泡时间为2小时，注意密闭；

D、连续逆流超声提取：将浸泡后的绞股蓝药材粉末采取连续逆流超声提取，超声波的频率为15--50Hz，连续可调，超声波的提取时间为30分钟/次，滤过，分离溶媒和药渣，共提取3次，提取温度45℃～60℃，合并滤液，药渣弃之，经过分离得到提取液；药渣经挤干机和烘干系统连续回收乙醇溶剂后自动排出药渣； 

E、第一次浓缩：提取液经过滤后进行减压双效浓缩回收乙醇至尽；提取液继续在负压为0.4-0.6Pa、温度为55℃±2℃的环境下减压，浓缩至每1ml相当于生药10.0g的浓缩液，在4℃中冷藏，静置12小时，吸取上清液，下层再进行高速离心澄清分离，合并滤液；

F、陶瓷膜分离：将滤液通过陶瓷膜进行微滤，得到有效地滤除大分子杂质的滤液；

G、大孔树脂纯化：将滤液泵入预先活化好的大孔吸附树脂柱中进行吸附富集，预先活化好的大孔吸附树脂柱应符合中性要求，从提取的上柱液中选择性地吸附皂苷成分，多次分别用水洗脱至无色、15%乙醇洗脱至基本无色，主要是洗去非皂苷类杂质，收集15%的乙醇液，回收乙醇；然后再用65%--75%的乙醇按照5-10%的级差梯度洗脱，将去杂后的总皂苷洗脱下来，经大孔吸附树脂纯化后的兽药用绞股蓝总皂苷的纯度经检测在85%以上；如果纯度不够规定的要求，应重新上柱分离，精制至合格才进入下一步骤；收集洗脱液，减压回收乙醇； 

H、第二次浓缩：用70%的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱，将去杂后的兽药用绞股蓝总皂苷洗脱下来，并将收集的洗脱液减压回收乙醇至尽，余液继续减压浓缩至60℃时测定相对密度为1.15-1.1.18的稠膏； 

I、成品：将稠膏经加压送入至减压喷雾干燥机进行干燥，喷雾干燥机的进风口温度为115℃，出风口温度为85℃、压力位-60Pa，得到含水量为不超过5%的粉末，经检测：粉末中绞股蓝总皂苷的含量≥850mg/g，再分装、喷批号、外包装，即得兽药用绞股蓝总皂苷。

2.根据权利要求1所述的高纯度兽药用绞股蓝总皂苷的制备方法，其特征在于：陶瓷膜的孔径为0.28-3.2微米，大孔吸附树脂的孔径为90A～100A、比表面积为500m2/g～550m2/g。

3.根据权利要求1所述的高纯度兽药用绞股蓝总皂苷的制备方法，其特征在于：在步骤G中树脂要进行预处理，步骤如下：     A、新树脂预先用水洗净，漂洗至PH中性，水弃之；

B、漂洗后的树脂粒用2M的稀盐酸（HCl）浸泡24小时，再将树脂与酸水层分离，将酸洗后的树脂用水反复冲洗至PH中性，得到酸洗后的中性树脂，酸水层下次调整浓度另用；

C、将酸洗后的中性树脂再用2M的氢氧化钠（NaOH）溶液浸泡24小时，后将碱洗后的树脂与碱水层分离，碱洗后的树脂用水反复冲洗至PH中性，得到碱洗后的中性树脂，碱水层下次调整浓度另用；

D、采用水装法装入大孔吸附树脂柱中，排空气体，用水洗脱至中性，得到符合要求的预先活化好的大孔吸附树脂柱。

4.根据权利要求3所述的高纯度兽药用绞股蓝总皂苷的制备方法，其特征在于：如阳离子树脂为H型、Na型或NH₄型，则分别用盐酸、氢氧化钠或氢氧化铵处理；如阴离子树脂为C1型、OH型，则可用盐酸或氢氧化钠分别处理。