[发明专利]南方根结线虫食道腺特异基因Msp40及其编码蛋白和其应用

权利要求书

1.一种蛋白，是如下1）或2）的蛋白：

1）序列表中的SEQ ID №.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

2）将序列表中的SEQ ID №.2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与线虫致病力相关的由1)衍生的蛋白质。

2.权利要求1所述蛋白的编码基因。

3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因具有下述核苷酸序列之一：

1）序列表中SEQ ID №：1第75-1019位的核苷酸序列；

2）编码序列表中SEQ ID №：2蛋白质序列的多核苷酸序列；

3）在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列；

4）与1）或2）或3）限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列；具体的，所述同源性为95%以上；再具体的为96%以上；再具体的为97%以上；再具体的为98%以上；再具体的为99%以上。

4.含有下述1）或2）所述核酸片段的重组载体、表达盒、转基因细胞系或宿主菌：

1）编码权利要求1所述蛋白的核酸分子全长或其任意片段；所述核酸分子可以是DNA，也可以是RNA；

2）权利要求2或3所述的编码基因全长或其任意片段。

5.扩增权利要求2或3所述的编码基因全长或其任意片段的引物对。

6.一种dsRNA，所述dsRNA具有下述核苷酸序列之一：

1）序列表中SEQ ID №：3所示的核苷酸序列；

2）在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID №：3限定的核苷酸序列杂交的核苷酸序列；

3）与1）或2）限定的核苷酸序列具有90％以上同源性的核苷酸序列；具体的，所述同源性为95%以上；再具体的为96%以上；再具体的为97%以上；再具体的为98%以上；再具体的为99%以上。

7.一种RNA干扰载体，所述载体为将DNA片段插入出发载体的多克隆位点中得到的；所述DNA片段为X正向—连接区—X反向；X正向为SEQ ID No.1中第289-646位核苷酸所示，X反向为X正向的反向互补片段；

或所述载体为将DNA片段插入出发载体的多克隆位点中得到的；所述DNA片段为Y正向—连接区—Y反向；Y正向为SEQ ID No.1中第721-1013位核苷酸所示，Y反向为Y正向的反向互补片段。

8.根据权利要求7所述的RNA干扰载体，其特征在于：所述X正向—连接区—X反向片段具有序列表中SEQ ID №.4所述的核苷酸序列；所述Y正向—连接区—Y反向片段具有序列表中SEQ ID №.5所述的核苷酸序列。

9.权利要求1所述蛋白、权利要求2或3所述基因、权利要求4所述重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌、权利要求5所述引物对、权利要求6所述dsRNA、或权利要求7或8所述的RNA干扰载体在如下1）-5）至少一种中的应用：

1）防治线虫对植物的侵害；

2）降低线虫的致病力或降低线虫的侵染力；

3）制备具有线虫抗性的转基因植物；

4）抑制靶基因的表达；

5）鉴定靶基因的功能。

所述靶基因为权利要求2或3所述基因或其同族基因。

10.一种制备具有线虫抗性的转基因植物的方法，包括将下述1）-4）任一核酸片段导入目的植物中，得到转基因植物：

1）根据权利要求1所述蛋白的编码基因全长或其任意片段制备得到的dsRNA；

2）权利要求6所述的dsRNA；

3）具有序列表中SEQ ID №：4所示核苷酸序列的核酸片段；

4)具有序列表中SEQ ID №：5所示核苷酸序列的核酸片段；

所述转基因植物对线虫的抗性强于所述目的植物；

或一种降低线虫的侵染力或致病力的方法，包括如下步骤：使出发线虫食取权利要求6所述dsRNA，得到的目的线虫的侵染力或致病力低于出发线虫。