[发明专利]一种植物乳杆菌、其细菌素以及培养与分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物乳杆菌及其细菌素，特别涉及一种植物乳杆菌、其细菌素以及培养与分离纯化方法。 

背景技术

在食品工业中，有关食品的防腐保鲜始终是一个亟待解决的重要问题。据FDA统计，全世界每年约有10%-20%的食品损失于各种腐败变质，在食品腐败变质的过程中，微生物起着决定性的作用。针对食品腐败变质的原因，采取不同的处理手段控制食品中的微生物，但是有些杀菌方法会对食品的质地、风味和营养产生不良影响。食品防腐剂因其使用方便有效，同时能很好地保存食品的商品价值，目前仍然是食品防腐的重要措施之一。 

乳酸菌及发酵产物人类已经有数千年的使用历史，现在不仅应用在食品制造，而且还应用在治病、保健方面。数千年的利用历史及无毒副作用的优良品质使乳酸菌被认为是GRAS（generally recognized as safe公认安全）菌。其发酵产物被视为GRAS物质。其中某些种类的乳酸菌在代谢过程中会由核糖体合成小分子多肽----细菌素，部分细菌素能抑制病原微生物、腐败性细菌的生长繁殖，具有防腐应用前景。目前，国内外研究最深、最透彻的乳酸链球菌素--Nisin，已在80多个国家和地区得到广泛应用（也是唯一一种得到商业化应用批准）。我国也于1992年将Nisin列入1992年10月1日实施的国标GB2660-86中的增补品种，可用于罐头食品、植物蛋白饮料、乳制品和肉制品的保藏中。然而，Nisin在碱性环境下活性较低；只对格兰阳性菌有作用，对格兰阴性致病菌、酵母、霉菌、病毒无抑制作用；活性受生物酶影响较大等限制了它的使用。因而继续筛选新的高效广谱乳酸菌细菌素成为近年来全世界范围内科学家的一个热门研究方向。 

目前我国食品添加剂标准（GB2760）允许使用的32种防腐剂中以化学防腐剂为主，天然防腐剂仅乳链菌肽（Nisin）和纳他霉素（Natamycin）两种。化学防腐剂通常成本较低、化学性能稳定以及抑菌谱较广、防腐效果好，但目前研究已表明，化学防腐剂对人体不同程度存在一定的毒性，其中一些具有诱癌性和致畸性，在超标使用的情况下易引起食物中毒。 

随着人民生活水平的提高和食品安全意识的增强，人们对食品的安全卫生和自身健康状况日益关注，不含化学防腐剂的天然食品和绿色食品更容易被消费者认可和接受。因此，研究开发高效安全无毒的天然防腐剂已成为当今国际食品添加剂发展的主要方向。 

我国允许使用的抗菌物质Nisin和Natamycin均为微生物源天然防腐剂。Nisin是乳酸链球菌合成的短肽分子，对革兰氏阳性菌，特别是对肉毒梭状芽孢杆菌及其孢子，嗜热脂肪芽孢及其孢子、金黄色葡萄球菌、李斯特菌等具有显著拮抗活性。Nisin是目前公认安全和应用范围最广的天然食品防腐剂，但也存在某些局限性，其抑菌谱较窄，仅对革兰氏阳性菌表现出显著抑制作用，对革兰氏阴性菌和真菌没有活性，在中性和碱性条件下对热不稳定，从而使其在食品中的应用受到一定限制。Natamycin源于放线菌纳塔尔霉菌（Streptomyces natalensis），为多烯烃大环内酯类真菌抑制剂，能有效抑制霉菌、酵母菌和丝状真菌，但对细菌和病毒无效。 

虽然国内外对不同来源的微生物天然防腐剂如乳酸菌细菌素、抗菌肽研究较多，但是在食品工业中实际应用很少，这主要是因为其中一些天然防腐剂抑菌谱窄，抑菌效果不够理想，抗菌性能不稳定，尤其是价格偏高、产率低且安全性未能得以确定，目前还很难取代化学防腐剂的作用和地位。因此，开发出广谱、高效、稳定、安全、产率高、低成本的天然食品防腐剂具有潜在应用价值和巨大的市场需求。 

发明内容

本发明的目的在于为了克服以上现有技术的不足而提供一种植物乳杆菌、其细菌素以及培养与分离纯化方法。 

本发明是由以下技术手段实现的： 

一种植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）163，菌种保藏号为CGMCC NO.8224。

上述植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）163，已于2013年9月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码100101），保藏登记号为CGMCC NO.8224。

一种细菌素，以上所述的植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）163发酵得到。 

所述的细菌素，可以具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。