[发明专利]一种用于高通量检测的微孔板及其应用

权利要求书

1.一种用于高通量检测的微孔板在高通量检测生化反应产生的气体中的应用，其特征在于，所述微孔板包括多个微孔组，所述微孔组至少包括第一微孔和第二微孔，所述微孔组还包括用于连通所述第一微孔和所述第二微孔的气体扩散通道，其中所述气体扩散通道设置于所述第一微孔和所述第二微孔间的微孔壁上；所述第一微孔为反应孔，所述第二微孔为检测孔，所述气体扩散通道允许所述第一微孔中的至少一种气体反应产物经所述气体扩散通道进入所述第二微孔；所述微孔板适用于酶标仪检测。

2.如权利要求1所述的应用，其中所述气体为H₂S、NO、CO、CO₂、C₂H₂、CH₄、O₂或H₂。

3.一种用于高通量检测的微孔板在高通量筛选酶活性调节剂中的应用，其特征在于，所述微孔板包括多个微孔组，所述微孔组至少包括第一微孔和第二微孔，所述微孔组还包括用于连通所述第一微孔和所述第二微孔的气体扩散通道，其中所述气体扩散通道设置于所述第一微孔和所述第二微孔间的微孔壁上；所述第一微孔为反应孔，所述第二微孔为检测孔，所述气体扩散通道允许所述第一微孔中的至少一种气体反应产物经所述气体扩散通道进入所述第二微孔；所述微孔板适用于酶标仪检测。

4.如权利要求3所述的应用，其中，所述酶活性调节剂为酶抑制剂或酶激活剂。

5.一种高通量筛选酶活性调节剂的方法，其特征在于，

提供一种微孔板，所述微孔板包括多个微孔组，所述微孔组包括反应微孔和检测微孔，所述微孔组还包括用于连通所述反应微孔和所述检测微孔的气体扩散通道；

步骤如下：

1)、配制生化反应体系

在所述反应微孔中，配制生化反应体系，

所述生化反应体系包括：酶、底物以及候选化合物；

2)、配制检测体系

在所述检测微孔中，配制检测体系；

3)、孵育反应

用封板膜密封微孔板后，孵育反应，反应体系中反应产生的酶催化产物，经所述气体扩散通道进入所述检测微孔中，与检测体系发生反应；

4)、检测

采用酶标仪对进入检测微孔中的酶催化产物进行定性或定量检测。

6.采用如权利要求5所述的方法，筛选CBS酶活性调节剂，其中，

步骤1)中，所述生化反应体系包括：Tris-HCl、PLP、CBS、L-Cys和D，L-HCys以及候选化合物；

步骤2)中，所述检测体系为DTNB溶液；

步骤3)中，反应体系中反应产生的H₂S气体，经所述气体扩散通道进入所述检测微孔中，与检测体系中的DTNB反应；

步骤4)中，用酶标仪测定413nm的光吸收，测定H₂S产生情况。

7.如权利要求6所述的方法，其中步骤1)中，所述反应体系中Tris-HCl浓度为50mM，PLP浓度为100μM，CBS浓度为100nM，L-Cys浓度为4mM，D,L-HCys浓度为4mM。