[发明专利]N-乙酰葡糖胺转移酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 201310465011.2 | 申请日： | 2013-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN103589695A | 公开（公告）日： | 2014-02-19 |
| 发明（设计）人： | 李荣杰;徐斌;汪本助 | 申请（专利权）人： | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N1/21;C12N15/70;C12P19/26;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 233030 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乙酰 葡糖 转移酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种N-乙酰葡糖胺转移酶突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。
2.编码权利要求1所述N-乙酰葡糖胺转移酶突变体的基因。
3.如权利要求2所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
4.含有权利要求2或3所述基因的载体。
5.含有权利要求2或3所述基因的转基因细胞系。
6.含有权利要求2或3所述基因的工程菌。
7.如权利要求6所述的工程菌，其特征在于，出发菌株为大肠杆菌。
8.权利要求1所述N-乙酰葡糖胺转移酶突变体在N-乙酰氨基葡萄糖合成中的应用。
9.一种利用大肠杆菌发酵生产N-乙酰氨基葡萄糖的方法，其特征在于，在大肠杆菌中过表达权利要求2或3所述基因，从而提高N-乙酰氨基葡萄糖的发酵产量。
10.权利要求1所述N-乙酰葡糖胺转移酶突变体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）PCR扩增编码所述N-乙酰葡糖胺转移酶突变体的基因；
2）将步骤1）所得PCR产物连接表达载体pET-28b；
3）连接产物转入大肠杆菌感受态细胞，获得表达产物；
其中，步骤1）中PCR扩增所用引物为：
正向引物：5′-GATCGGATCCATGAGCTTACCCGATGGATTTTATATAAGGC-3′；
反向引物：5′-GATCCTCGAGCTATTTTCTAATTTGCATTTCCACGCCTGC-3′。
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