[发明专利]靶向整合外源DNA序列到大鼠和小鼠Rosa26位点的方法及其应用有效
| 申请号： | 201310455151.1 | 申请日： | 2013-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN103540587A | 公开（公告）日： | 2014-01-29 |
| 发明（设计）人： | 杨兴林;陈国泽;彭娟;潘讴东;王富杰;夏清梅;殷珊 | 申请（专利权）人： | 和元生物技术(上海)有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02;A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人： | 高月红 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 靶向 整合 dna 序列 大鼠 小鼠 rosa26 方法 及其 应用 | ||
1.一种用于靶向整合外源DNA序列到大鼠和小鼠的TALEN识别Rosa26位点，其特征在于：所述TALEN识别Rosa26位点的上游识别序列如SEQ ID NO.1所示，下游识别序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一对用于识别如权利要求1所述的位点的TALEN质粒，其特征在于：所述一对TALEN质粒是上游TALEN质粒和下游TALEN质粒，其中，上游TALEN质粒含有SEQ ID NO.3所示的碱基序列，下游TALEN质粒含有SEQ ID NO.4所示的碱基序列。
3.如权利要求2所述的TALEN质粒，其特征在于：所述上游TALEN质粒为含有SEQ IDNO.3所示的碱基序列的HY-TALEN-Rosa26-U质粒，下游TALEN质粒为含有SEQ ID NO.4所示的碱基序列的HY-TALEN-Rosa26-D质粒。
4.一种用于靶向整合外源DNA序列到小鼠的TALEN识别Rosa26位点的小鼠同源重组模板质粒，其特征在于：所述质粒含有SEQ ID NO.5所示的碱基序列。
5.如权利要求4所述的质粒，其特征在于：所述质粒为含有SEQ ID NO.5所示的碱基序列的HY-HR-mRosa26质粒。
6.一种用于靶向整合外源DNA序列到大鼠的TALEN识别Rosa26位点的大鼠同源重组模板质粒，其特征在于：所述质粒含有SEQ ID NO.6所示的碱基序列。
7.如权利要求6所述的质粒，其特征在于：所述质粒为含有SEQ ID NO.6所示的碱基序列的HY-HR-rRosa26质粒。
8.一种定点整合细胞株构建方法，其特征在于：所述细胞株构建方法使用含有一对如权利要求2所述的TALEN质粒和如权利要求4所述的小鼠同源重组模板质粒；或使用含有一对如权利要求2所述的TALEN质粒和如权利要求6所述的大鼠同源重组模板质粒。
9.一种用于靶向整合外源DNA序列到大鼠和小鼠的TALEN识别Rosa26位点的试剂盒，其特征在于，包括：如权利要求2所述的TALEN质粒、如权利要求4所述的小鼠同源重组模板质粒和如权利要求6所述的大鼠同源重组模板质粒。
10.一种如权利要求9所述的试剂盒的应用，其特征在于：所述试剂盒在药物筛选和动物模型制备中的应用。
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