[发明专利]高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽及其制备方法和用途有效
申请号: | 201310454514.X | 申请日: | 2013-09-29 |
公开(公告)号: | CN103539833A | 公开(公告)日: | 2014-01-29 |
发明(设计)人: | 王建中;顾欣;王丰俊;崔洁;黄昆;王文江 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | C07K5/078 | 分类号: | C07K5/078;C07K5/062;C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;C07K1/30;A61K38/05;A61P3/10;A23L1/29 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 李志东 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 活性 葡萄 糖苷酶 抑制 及其 制备 方法 用途 | ||
技术领域
本发明涉及保健性功能食品及药品制备领域。具体地,本发明涉及高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽及其制备方法和用途。
背景技术
糖尿病已经被列为第三大致死性疾病,严重威胁着人类的健康。如何治疗糖尿病已经成为世界范围内的重点研究课题。目前糖尿病患者主要以Ⅱ型糖尿病居多,治疗Ⅱ型糖尿病的药物也有很多种,其中主要有胰岛素促泌剂,双胍类,胰岛素分泌模式调节剂以及α-葡萄糖苷酶抑制剂等。其中,阿卡波糖这类人工合成的α-葡萄糖苷酶抑制剂在临床上会伴随一些副作用的发生,因此开发更多天然的、安全的α-葡萄糖苷酶抑制剂对Ⅱ型糖尿病的治疗有着重大的意义。
然而,目前制备天然的α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法仍有待改进。
发明内容
本发明是基于发明人的下列发现而完成的:
山杏Armaniaca sibirica在我国黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、甘肃、河北、山西等省区均有分布。山杏仁营养丰富,富含蛋白质、脂肪、矿物质和维生素,其蛋白质、氨基酸总量、必需氨基酸含量均较高,有很高的经济价值和药用价值。而山杏仁蛋白质还具有抗肿瘤、降血压、降血糖、降胆固醇等功效。发明人发现,利用山杏仁粕粉筛选高活性的α-葡萄糖苷酶抑制肽既可以良好利用山杏仁加工的剩余产物,又可以得到高活性的α-葡萄糖苷酶抑制肽。
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此,本发明的一个目的在于提出一种制备天然、高活性的α-葡萄糖苷酶抑制肽的方法及其产品。
根据本发明的一个方面,本发明提供了一种高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽。根据本发明的实施例,该α-葡萄糖苷酶抑制肽具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。根据本发明的具体示例,本发明的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽的序列为(C端—N端):色氨酸-丙氨酸(Trp–Ala,WA)。发明人惊奇地发现,本发明的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽,其α-葡萄糖苷酶抑制活性非常高,能够有效地抑制α-葡萄糖苷酶的活性,进而能够有效地用于降血糖,以及治疗高血糖、糖尿病药物的制备,并且该高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽的生产成本低,具有巨大的实用价值和经济效益。
根据本发明的另一方面,本发明还提供了一种制备上述高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽的方法。根据本发明的实施例,该方法包括:利用等电点沉淀法从脱脂山杏仁粕粉中提取蛋白质;利用碱性蛋白酶对所述蛋白质进行水解,以便获得水解产物;以及对所述水解产物依次进行超滤处理、凝胶色谱处理、第一反相高效液相色谱处理和第二反相高效液相色谱处理,以便获得所述高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽。发明人惊奇地发现,利用该方法能够有效地制备具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽,并且该高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽纯度高,能够有效地抑制α-葡萄糖苷酶的活性,进一步通过抑制α-葡萄糖苷酶的活性能够控制血压,从而能够有效地应用于治疗高血压药物的制备。
根据本发明的又一方面,本发明还提供了前面所述的具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽在制备药物或功能食品中的用途,所述药物或功能食品用于降血糖。
此外,需要说明的是,本发明的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽及其制备方法,现阶段尚未见报道,其是本申请的发明人经过艰苦的创造性劳动和优化的工作,从山杏仁粕粉中提取获得的新的、天然、安全的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽,这为更安全、有效的降血糖药物的制备提供了新希望。而本领域的技术人员可以理解的是,还可以根据本发明提供的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽的氨基酸序列,即SEQ ID NO:1所示的:色氨酸-丙氨酸(Trp–Ala,WA),利用肽自动合成仪通过合成方法人工合成该高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解,其中:
图1显示了根据本发明一个实施例,制备高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽过程中的Sephadex G25Medium柱层析色谱图;
图2显示了根据本发明一个实施例,制备高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽过程中的第一反相高效液相色谱图;
图3显示了根据本发明一个实施例,制备高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽过程中的第二反相高效液相色谱处理的色谱图,其中,
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