[发明专利]一种达沙替尼中间体的分析检测方法

说明书

本发明公开了一种达沙替尼中间体的分析检测方法，用于达沙替尼中间体的质量控制，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱（C18，4.6×250mm，5μm），以缓冲盐溶液、乙腈和三氟乙酸混合体系为流动相，以检测波长为320nm，柱温为20～30℃，进行高效液相色谱法分析检测。本发明的分析检测方法选用普通的色谱柱及液相色谱系统，价格低廉，实用性高，可以有效的将达沙替尼中间体及其杂质分开，而且该方法具有分析时间短，灵敏度高，线性关系良好，操作简单，重复性及耐用性好，结果稳定可靠的优点。

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱分析方法，尤其是一种达沙替尼中间体的分析检测方法。

背景技术

达沙替尼是一种口服酪氨酸激酶抑制剂，于2006年经FDA批准，用于治疗由BCR-ABL激酶突变引起的白血病，其疗效优于伊马替尼，且未发现耐药性。

N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺是达沙替尼的重要中间体，其化学式为C₁₆H₁₃Cl₂N₅OS，结构式为：

达沙替尼中间体的分析检测对反应控制和收率提高有着重要的作用，同时也直接影响着终产品的质量，Alban J.Allentoff等人的文献（Synthesis of¹⁴C-labeledand¹³C-,¹⁵N-labeled dasatinib and its piperazine N-dealkyl metabolite，J.LabelCompd.Radiopharm2008,51：41–47）中公开了该中间体的一种HPLC分析方法，但该方法较为繁琐，分析时间长，且使用的色谱柱价格较贵，在研发及生产中普遍应用的实用性低，不适合推广使用，所以建立一种成本低廉、使用普通色谱柱及液相系统且操作简单，但稳定有效的分析检测方法对达沙替尼中间体进行分析检测是非常必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种使用普通色谱柱及液相系统且操作简单，但稳定有效的达沙替尼中间体的高效液相色谱分析检测方法，用于达沙替尼中间体的质量控制。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验，最终获得如下技术方案：

一种达沙替尼中间体的分析检测方法，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱（C18，4.6×250mm，5μm），以缓冲盐溶液、乙腈和三氟乙酸混合体系为流动相，以检测波长为320nm，柱温为20～30℃，进行高效液相色谱法分析检测。

所述的缓冲盐溶液选自醋酸钠溶液或醋酸铵溶液，浓度为0.01～0.05mol/L，优选为醋酸钠溶液。

所述流动相中缓冲盐溶液：乙腈的体积比为45～65:55～35，三氟乙酸体积为前两者体积和的0.2%。

进一步地，流动相中缓冲盐溶液：乙腈：三氟乙酸的体积比优选为50～60:50～40，最优选为55:45，三氟乙酸体积为前两者体积和的0.2%。

所述的柱温优选为25℃。

本发明所述的分析检测方法，可通过以下步骤实现：

A、取达沙替尼中间体适量，加流动相溶解，配制成每1mL含达沙替尼中间体0.04～0.32mg的样品溶液；

B、设置流动相流速为0.5～1.2mL/min，检测波长320nm，柱温为20～30℃；

C、取A的样品溶液10μL注入液相色谱仪，完成达沙替尼中间体的分析检测；

其中：

高效液相色谱仪：Agilent1100液相色谱系统，DAD检测器；