[发明专利]一种鸡基因的单核苷酸多态性、检测方法及其应用

权利要求书

1.一种鸡miRNA-1704基因的单核苷酸多态性，其特征在于，所述单核苷酸多态性为在如SEQ ID NO.3所示的鸡miRNA-1704基因序列中，其序列第148位为C或G。 

2.一种鸡miRNA-1704基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： 

（1）以包含miRNA-1704基因的鸡全基因组DNA为模板，设计一对引物； 

（2）以引物对P为引物，PCR扩增鸡miRNA-1704基因； 

（3）用限制性内切酶EcoRⅠ消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定鸡miRNA-1704基因序列中第148位的单核苷酸多态性：当鸡miRNA-1704基因的第148位点为G时，酶切后电泳图谱为两条带，条带大小为184bp和148bp，命名为GG基因型；当鸡miRNA-1704基因的第148位点为C时，酶切后电泳图谱为一条带，条带大小为332bp，命名为CC基因型；当鸡miRNA-1704基因的第148位点为杂合的个体时，酶切后电泳图谱为三条带，条带大小为332bp,184bp和148bp，命名为GC基因型。 

3.根据权利要求2所述的一种鸡miRNA-1704基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的引物对P为： 

正向引物：5’-AGCTCTGTTGGGTTGAAGGAGTAG-3’； 

反向引物：5’-GTGCATCTCCCACAGCTGCCATAG-3’。 

4.根据权利要求2所述的一种鸡miRNA-1704基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系为：2×Taq PCR Master Mix12μL、10pmol/L的正、反向引物各1μL、100ng/μL DNA模板0.5μL、灭菌超纯水10.5μL，总体积25μL。 

5.根据权利要求2所述的一种鸡miRNA-1704基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，60.2℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；72℃延伸10min。 

6.根据权利要求2所述的一种鸡miRNA-1704基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶电泳所用的琼脂的质量分数为1.5%。 

7.一种鸡miRNA-1704基因的单核苷酸多态性的检测方法的应用，其特征在于，所述的检测方法可用于鸡的辅助选择和分子育种。 

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，通过将基因型与鸡的生长性状进行关联性分析，确定基因与性状的对应关系，用于鸡的分子育种。