[发明专利]一种高含量枣环磷酸腺苷提取物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物有效成分的提取和富集生产领域，尤其是一种高含量枣环磷酸腺苷提取物的制备方法。 

背景技术

环磷酸腺苷（cyclic ademodsine monophosphate,简称cAMP）是一种蛋白激酶制活剂，广泛存在于生物体的组织与细胞内。其受神经内分泌系统的控制，作为肽类激素、儿茶酚胺和前列腺素等激素的第二信使发挥生物效应。基础医学与临床医学研究证明，cAMP可以通过促进脑细胞代谢、修复衰老和疲劳脑细胞，阻止脑细胞衰老，从而改善睡眠与记忆力；对机体淋巴细胞转化、抗体的形成与释放、细胞免疫等生理功能有重要的调节作用，从而增强免疫力、选择性抑制机体免疫反应，改善过敏性皮炎、麻疹、哮喘等免疫功能；抑制细胞增殖、促进细胞分化，起到抗肿瘤的作用；通过营养心肌、正性肌力、舒张血管等途径改善心血管功能；调节神经递质合成，促进激素分泌，维持正常的人体生理活动。 

1991年，刘孟军等借助蛋白结合法对14种园艺植物的cAMP含量进行了测定，发现大枣中cAMP的含量最高，其成熟果肉中cAMP的含量为一般动植物材料的数千至数万倍，范围在60-800μg/g，其中，被誉为“中华金丝小枣第一县”的无棣县盛产的金丝小枣中cAMP的含量较高；韩利文等人报道，山东沂蒙山大雪枣中cAMP与金丝小枣含量相当。 

目前，环磷酸腺苷制剂的制备方法主要包括化学合成法、微生物发酵法和传统提取工艺合并柱层析纯化。其中，化学合成法例如申艳红等（2003）以腺苷为原料，三氯氧磷为磷酰化试剂，用磷酸三乙酯作溶剂，低温下生成腺苷的5’位二氯磷酸酯，将此中间体与反应体系分离，融入适当的溶剂，于搅拌下慢慢加入到KOH的水和乙腈溶液中，强碱环化得到3’,5’-环磷酸腺苷，从乙醇和水中重结晶后纯度可达到98.5%，总收率58%；微生物发酵法例如日本研究者（Kokai Tokyyo Koho，1997）采用基因重组的手段获得了菌种 Escherichiacoli K-11，可发酵生产cAMP，采用摇床在28℃培养14h，培养基为葡萄糖0.5%，KH₂PO₄1.4%，（NH₄）₂SO₄0.2%，MgSO₄·7H₂O 0.02%，蛋白胨0.4%，酵母粉0.02%，培养液中cAMP的浓度为3.9%mg/150mL；CN 100425620C公开了一种从枣中提取环磷酸腺苷的工艺，采用浸泡-超声提取红枣，得到澄清枣汁，枣汁通过阴离子交换柱，甲酸水溶液洗脱，氨水溶液调节pH值，再过阴离子交换柱，收集的洗脱液通过层析柱（硅胶型，或者大孔树脂型，或者聚酰胺型），再用水或乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩后加入无水乙醇结晶，得到高纯度环磷酸腺苷粉。 

然而，上述化学合成法所用的试剂有一定毒性，污染环境；且技术复杂，价格昂贵，难以实现大规模生产；由于合成过程中的副产物原因，适用范围很小，主要用于心绞痛、心肌梗死、心肌炎及心源性休克等心血管疾病的治疗，使用过量会有毒副作用。柱层析法在分离过程中使用了一些刺激性的试剂，对层析柱填料的安全性要求也很高。微生物发酵法由于受到菌种限制且难以分离，使用起来也有一定的局限性。常用的提取方法采用的设备大部分是单元批次式，难以形成连续化生产的规模，影响提取过程标准化进程。 

可见，针对现有技术中存在的溶剂消耗量大、周期长、自动化水平低，化学合成过程中副产物多等技术问题，寻求一种新的环磷酸腺苷的生产工艺具有非常重要的生产实践意义。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种高含量枣环磷酸腺苷提取物。 

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述高含量枣环磷酸腺苷提取物的制备方法。 

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是： 

一种高含量枣环磷酸腺苷提取物，所述提取物中环磷酸腺苷的浓度为每15mg/100g以上，环磷酸腺苷自原料的转利率达90%以上，该提取物是由下述方法得到的：采用枣的固体或半固体原料，经高压差连续式低温提取器提取，提取液浓缩后，真空干燥，粉碎得枣的粗提物；采用超临界萃取技术萃取粗提物，得到枣环磷酸腺苷提取物。 

一种高含量枣环磷酸腺苷提取物的制备方法，采用枣的固体或半固体原 料，经高压差连续式低温提取器提取，提取液浓缩后，真空干燥，粉碎得枣的粗提物；采用超临界萃取技术萃取粗提物，得到高含量枣环磷酸腺苷提取物。 

优选的，上述高含量枣环磷酸腺苷提取物的制备方法，具体步骤如下：