[发明专利]一种提高昆虫核型多角体病毒繁殖效率的人工饲料配方

说明书

一、技术领域

本发明属于害虫生物防治技术领域，具体涉及一种利用改进的人工饲料配方提高昆虫核型多角体病毒繁殖效率的方法。 

二、技术背景

作为一种生物杀虫剂，昆虫病毒因具有对靶标害虫致病性高、能在害虫种群中自然传播而长期流行以及不易产生抗药性等明显优于其它杀虫剂的优点，长期以来备受人们关注。 

斜纹夜蛾核型多角体病毒Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus(S1NPV)是斜纹夜蛾的重要病原微生物，已被开发为病毒杀虫剂产品，用于斜纹夜蛾等的田间防治。昆虫病毒的高效繁殖是成功实现其商品化的重要因素之一，病毒的繁殖包括在活体宿主中繁殖和在昆虫细胞中繁殖。用昆虫细胞繁殖病毒具有宿主细胞易培养和病毒繁殖周期短等优点，但同昆虫活体宿主中繁殖不同的是，其同时也具有成本高及病毒毒力易退化等缺点，因而目前昆虫病毒的规模繁殖仍以活体宿主繁殖为主。同其它核型多角体病毒的规模繁殖方式相类似，S1NPV的繁殖也以活体宿主中繁殖为主。 

如何实现S1NPV在活体宿主中的高效繁殖对于降低病毒的应用成本以及扩大病毒的应用范围等至关重要。S1NPV主要用宿主斜纹夜蛾来进行繁殖，而斜纹夜蛾的饲养以人工饲料为主，人工饲料的配方与宿主的生长及病毒的繁殖密切相关。因此，研究通过人工饲料配方的改进来提高SlNPV的繁殖效率具有重要意义。 

三、发明内容

1、发明目的 

提供一种利用改进的昆虫人工饲料配方来提高昆虫病毒的繁殖效率，能安全有效地提高昆虫核型多角体病毒的繁殖效率，降低病毒杀虫剂的成本及扩大病毒杀虫剂的应用前景。 

2、技术方案 

为达到上述目的，本发明选用各成份配比经调整的斜纹夜蛾人工饲料配方，作为用斜纹夜蛾进行病毒繁殖时的饲料配方，它的应用显著提高了昆虫病毒的产量。 

本发明为一种病毒繁殖效率提高的方法，其特征在于应用调整后的昆虫人工饲料配方，提高了病毒的繁殖效率。 

3、有益效果 

本发明的方法与现有技术相比，产生以下有益效果：(1)与传统人工饲料配方相比， 明显增效，显著增加了病毒的产量，切实提高了病毒繁殖效率；(2)有效降低了病毒的繁殖成本，扩大了病毒的应用前景。 

四、具体实施方式：

本发明的实施例是采用室内生物测定的方法。通过室内生物测定，明确饲料配方改进对于SlNPV产量的提高作用。 

供试材料：SlNPV为实验室内保存病毒株系，试虫为室内长期人工饲养的斜纹夜蛾幼虫。 

试验方法：采用饲料喂毒法测定斜纹夜蛾不同饲料配方对病毒产量的影响，共4种不同饲料配方(表1)。将人工饲料切开大小一致的立方体，放入6孔板中，每孔1块，每块饲料表面加入100μl病毒液，然后接入斜纹夜蛾4龄初期幼虫，每孔6头，待含病毒饲料被取食完后，继续加相同配方的无病毒人工饲料。每处理6板，试验在29℃±1℃的光照培养箱中进行。每12小时对板中病虫进行一次收集，将同一处理每2板中病虫收集于同一个容器中。待所有染病虫收集完成，在病虫中加水，用纱布过滤，然后对过滤液用500rpm／min和3000rpm／min进行差速离心，500rpm／min离心5min，保留上清，再用3000rpm／min离心5min，保留沉淀，反复4次以上，直至病毒纯化。用血球计数板对纯化后的病毒包涵体在显微镜下进行计数，统计各处理产量。 

应用DPS软件并采用Tukey法进行差异显著性分析。 

表1各饲料配方具体成份及重量 

实施效果 

实施例：

研究了斜纹夜蛾饲料配方调整对病毒产量的提高作用(表2)，结果表明，人工饲料配方调整对SlNPV产量有着显著的提高作用。三种调整的人工饲料配方中，以调整配方2对病毒产量的提高作用最为突出，用此饲料配方繁殖病毒，平均每个6孔板的病毒产量达14.57×10¹⁰0Bs(包涵体，下同)，而用常规饲料配方生产的病毒，每个6孔板的产量仅为6.89×10¹⁰0Bs，利用调整配方2生产病毒可使病毒产量提高1.11倍，两者间 差异极显著；另两个调整配方对病毒产量未表现出显著的提升作用。