[发明专利]一种从紫菜酶解产物中分离α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法有效
| 申请号： | 201310422683.5 | 申请日： | 2013-09-17 |
| 公开（公告）号： | CN103468774A | 公开（公告）日： | 2013-12-25 |
| 发明（设计）人： | 田亚平;周锋;刘冬冬 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/18;C07K1/16 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 紫菜 产物 分离 葡萄 糖苷酶 抑制剂 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种从紫菜酶解产物中分离α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于：步骤为：
（1）α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取：以烘干至恒重的末水条斑紫菜粉末为底物，以pH7.0 Na2HPO4-KH2PO4缓冲液为介质，底物与缓冲液的质量比为1:25～33，沸水浴热处理15 min；加入中性蛋白酶 E/S=8×104 U/g，50℃水解7 h，沸水浴灭酶15 min；调节pH8.5，加入固体氨肽酶 E/S=28 U/g和碱性蛋白酶 E/S=8×104 U/g，50℃水解3 h，沸水浴灭酶15 min；加入乙醇至终浓度为60%，室温静置过夜，8000 r/min离心10 min，上清液为含α-葡萄糖苷酶抑制剂的混合物；
（2）α-葡萄糖苷酶抑制剂分离纯化：将含α-葡萄糖苷酶抑制剂的混合物通过活性炭脱色，再将该活性炭脱色液依次经过SP Sepharose High Performance 阳离子交换层析、Sephadex G-10凝胶层析和Mono Q 阴离子交换层析分离纯化后，得到α-葡萄糖苷酶抑制剂。
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