[发明专利]荧光定量PCR检测巨细胞病毒gH基因分型试剂盒及应用有效
| 申请号： | 201310414995.1 | 申请日： | 2013-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN103540685A | 公开（公告）日： | 2014-01-29 |
| 发明（设计）人： | 李伟;尚世强;舒强;陶然;楼金吐;李华美;董敖;彭朝阳;周明明 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12M1/00;G01N21/64 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 张法高;赵杭丽 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 荧光 定量 pcr 检测 巨细 病毒 gh 基因 试剂盒 应用 | ||
1. 一种荧光定量PCR检测巨细胞病毒gH基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液管（1）、gH1型标准品管（2）、gH2型标准品管（3）、阳性对照品管（4）、阴性对照品管（5）、病毒DNA抽提裂解液管（6）、操作说明书（7）、盒体组成（8）组成，盒体(8)设有容器孔，分别放置PCR反应液管（1）、gH1型标准品管（2）、gH2型标准品管（3）、阳性对照品管（4）、阴性对照品管（5）、病毒DNA抽提裂解液管（6），定量PCR反应液管（1）由单管分装，矩阵排列，定量PCR反应液管（1）装有PCR缓冲液，Mgcl2，dNTPs，巨细胞病毒gH基因通用上游引物，巨细胞病毒gH基因通用下游引物，荧光探针，Taq DNA聚合酶；其中：
上游引物序列为：5’-TGTTTTCACGCAGGAAGCGG-3’，
下游引物序列为：5’-TGGATCACGCCGCTGAACC-3’，
gH1型探针为：5’-FAM-CATCCGAAGCGCTGGACCCTCACG-BHQ1-3’，
gH2型探针为：5’-HEX-TATCCGAACCGCTGGACAAAGCG-BHQ1-3’；
gH1型标准品序列为：
tgttttcacgcaggaagcggatgggtctcccgtaggtgttgagtagtaggtgaaatgcgtgagggtccagcgcttcggatgcggcgtccgcgccatatcgttgcgaaggtaggtgactgaggaggtagacggtgaagacagtgaggtagggggggaggccgggccgcatagcgcggctgcgccgctgggttcagcggcgtgatcca；
gH2型标准品序列为：
tgttttcacgcaggaagcggatgggtctcccgtaggtgttgagcagtaggtgaaacgctttgtccagcggttcggatatggcttctgcgccatatcgtgacgaaagtaggtggctgaggagacagacggcgaggacgatgaggtaggaggggaggcctggccgcatagcgcggccgcgccgctgggttcagcggcgtgatcca；
病毒DNA抽提裂解液管（6）装有10mmol/L Tri-HCL,pH 7.6 5mmol/LEDTA,0.5%SDS。
2.根据权利要求1所述的一种荧光定量PCR检测巨细胞病毒gH基因分型试剂盒，其特征在于，阳性对照品管（4）装有巨细胞病毒AD169株和TOWNE株的灭活DNA样品，阴性对照品管（5）装有无菌注射用水。
3.根据权利要求1所述一种荧光定量PCR检测巨细胞病毒gH基因分型试剂盒，其特征在于，试剂盒保存在-20℃，避免反复冻融。
4.根据权利要求1所述的一种实时荧光PCR检测巨细胞病毒gH基因分型试剂盒在鉴别巨细胞病毒gH基因分型中的应用。
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