[发明专利]一种花青素脂质体的制备方法

权利要求书

1.一种花青素脂质体的制备方法，其特征在于应用pH梯度结合逆相蒸发法，并通过挤压过膜或循环高压均质处理，得到不同粒径分布的脂质体。其制备通过以下步骤和工艺条件实现：

(1)成膜：称取一定量的磷脂和胆固醇，用适量的有机溶剂溶解，并在温度为15℃～35℃下减压旋转蒸发缓慢除去有机溶剂，直至瓶内壁上形成一层均匀的浅黄色膜脂；

(2)超声波处理：向梨形烧瓶中重新加入有机溶剂将膜脂溶解，再加入酸性的含有稳定剂的花青素(pH＝2.0)溶液震荡混合；将该混合液短时间间歇超声处理，使其形成外观均一的乳状液；

(3)减压旋转蒸发：将梨形瓶置于25℃～35℃的水浴中，旋转蒸发直至凝胶从瓶底脱落；

(4)水合：向(3)中的烧瓶里加pH7.0的磷酸盐缓冲液，室温下震荡后得到内、外水相具有pH梯度差的脂质体粗混悬液；

(5)粒径控制：将上述脂质体初混悬液依次挤压通过0.45μm、0.25μm、0.10μm的滤膜，或用高压均质机均质，得到不同粒径分布(120nm～230nm)的脂质体。

(6)冷冻干燥：将在上述脂质体混悬液加入保护剂，经预冷冻后进行冷冻干燥，得到花青素脂质体的冻干粉。

2.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，其中所说的磷脂包括豆磷脂、蛋磷脂及其它可用于食品药品的磷脂中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，其中所使用的有机溶剂可以是乙醚，氯仿等弱极性，与水不混溶的溶剂。

4.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，含稳定剂花青素酸性溶液的制备中使用的稳定剂为抗坏血酸、维生素E、小分子酚酸等具有生物活性的花青素稳定剂，花青素溶液的配制采用pH2的磷酸缓冲液。

5.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，冻干保护剂包括下列物质的一种或多种：海藻糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖等二糖或棉子糖等其它寡聚糖，氯化钠，磷酸盐。

6.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，其特征(1)在于通过将磷脂与胆固醇溶液混合并用有机溶剂溶解，再通过缓慢减压蒸发，首先制成一层膜。磷脂与胆固醇的摩尔比为1：1～1：5。

7.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，其特征(2)在于花青素溶于pH为2的含花青素稳定剂的酸性缓冲溶液中，使得制成的花青素脂质体所处内水相为酸性，从而保持了花青素原有的结构和具有足够的稳定性。花青素与稳定剂的重量比为20：1～20：5。

8.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，其特征(3)在于磷脂与花青素的质量比为10：1～50：1。

9.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，其特征(4)加入pH7.0的磷酸缓冲液水合，冻干保护剂可以溶在该缓冲溶液中，也可以在形成脂质体混悬液后加入。冻干保护剂的加入量为2～30g／100ml。

10.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，其特征(4)通过挤压过膜或循环高压均质，形成不同粒径分布范围的花青素脂质体。

11.根据权利要求1所述的花青素脂质体制备方法，其特征(5)经过预冷冻、冷冻干燥，得到花青素脂质体的冻干粉。该冻干粉易于保存，可作为功能保健品、药物和化妆品的原料使用。