[发明专利]一种固环合成阿托西班的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种多肽药物的制备方法，特别涉及一种催产素竞争性拮抗剂阿托西班的固相合成方法。 

背景技术

阿托西班，英文名称为：Atosiban，结构如下： c[Mpa-D-Tyr(OEt)-Ile-Thr-Asn-Cys]-Pro-Orn-Gly-NH₂，其为环状性多肽，中国专利( 申请号：200810043347.9、200910008880.6、201010552213.7)报道的方法：都按照Fmoc/tbu固相多肽合成的方法将氨基酸逐个连上，再用树脂上碘氧化的方法形成硫硫键，最后裂解得到阿托西班。其中所用碘的溶剂和裂解液有所不同，溶剂分别为甲醇、DCM和DMF；裂解液分别为：三氟醋酸/三异丙基硅烷/水/对甲酚、三氟乙酸/硫代苯甲醚/1,2-乙二硫醇/水和三氟醋酸/乙二硫醚/水。固环相对液环，操作简单，步骤少，但是实验收率不如液环高。 

中国专利( 公开号：CN102127146A)报道的方法：合成获得线性阿托西班；将线性阿托西班溶于乙腈水溶液中，用氨水调节pH，加入H₂O₂氧化，过滤，纯化，转盐，得到醋酸阿托西班。该方法解决了线性阿托西班难溶问题，最大可能的缩小了反应体积及减少了反应时间，该方法收率高，但是纯化前需要处理乙腈，操作复杂，步骤相当费时，不利于工业生产。 

中国专利( 公告号：CN101357937B)报道的方法：合成获得线性阿托西班；将线性阿托西班溶于水溶液中，用氨水调节pH，空气氧化，纯化，转盐，得到醋酸阿托西班，该方法三废污染少，但是空气氧化时间长，相当费时，不利于工业生产。 

发明内容

本发明的目的是提供一种固环合成阿托西班的工艺方法。本发明需要解决的技术问题是： (1) 选择一种固环合成方法，解决液相氧化带来的大量废液，固相合成收率低的问题； (2) 选择一种氧化剂替代碘，解决碘作为氧化剂氧化的副产物多，收率不高的问题。 

本发明的制备方法如图1所示，首先在AM树脂上依次偶联上图1中所示的9个氨基酸，偶联的氨基酸顺序为：Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Orn(Boc)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-D-Tyr(Et)-OH、Mpa(Trt)-OH，然后使用1%TFA/DCM去除Cys(Trt)上的保护基Trt，接着加氧化试剂固环得到环肽树脂，最后在裂解试剂下得到阿托西班。 

本发明中一些常用的缩写具有以下含义； 

Fmoc ：芴甲氧羰基

Fmoc-AA ：芴甲氧羰基保护的氨基酸

tBu ：叔丁基

HoBt ：1- 羟基苯骈三唑

DIC ：N，N′- 二异丙基碳化二亚胺

MPa ：巯基丙酸

D-Tyr(Et) ：D- 型的酪氨酸链用乙基保护

Ile ：异亮氨酸

Thr ：苏氨酸

Asn ：天门冬酰胺

Cys ：半胱氨酸

Pro ：脯氨酸

Orn ：鸟氨酸

Gly ：甘氨酸

Trt ：三苯甲基

Et ：乙基

Boc ：叔丁氧羰基

DMF ：N，N′- 二甲基甲酰胺

Piperidine ：六氢吡啶

Fmoc-Rink Amide Am resin ：用Fmoc 保护的Rink 氨甲基树脂

TFA ：三氟醋酸

PhSMe：苯甲硫醚

MeOH ：甲醇

DCM：二氯甲烷

Kniser test 检测试剂为：茚三酮

氧化剂为：过氧化尿素，溶剂：DMSO

为此，本发明提供一种固环合成阿托西班的方法，所述方法步骤如下：

步骤1，固相合成线性阿托西班树脂；

步骤2，将Cys(Trt)上的保护基Trt脱保护；

步骤3，用氧化剂固环得到环肽树脂；

步骤4，裂解去除树脂及保护基团得到阿托西班。

其中，步骤1所述线性阿托西班树脂，结构如下： 

Mpa(Trt)-Tyr(Et)-Ile-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-Gly-NH-Resin