[发明专利]一种酶活及热稳定性提高的过氧化氢酶突变体有效
| 申请号： | 201310410789.3 | 申请日： | 2013-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN103451163A | 公开（公告）日： | 2013-12-18 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;堵国成;康振;曹汶龙 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08;C12N15/53;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/125;C12R1/11 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 何自刚;王玉松 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 热稳定性 提高 过氧化氢酶 突变体 | ||
1.一种酶活及热稳定性提高的过氧化氢酶突变体，其特征在于，是对氨基酸序列如NCBI登录号BAB21251.1所示的过氧化氢酶进行定点突变得到。
2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，是对过氧化氢酶第114位的赖氨酸K进行突变。
3.根据权利要求2所述的突变体，其特征在于，是将过氧化氢酶第114位的赖氨酸K突变为酪氨酸Y、缬氨酸V、蛋氨酸M或异亮氨酸I。
4.编码权利要求1所述突变体的基因。
5.含有权利要求4所述基因的质粒或细胞。
6.获得权利要求1所述突变体的方法，其特征在于，是以质粒pStop1622-katA为模版，设计引物，通过PCR获得编码突变体的基因及质粒，以枯草芽孢杆菌为宿主表达过氧化氢酶突变体。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，是以质粒pStop1622-katA为模版，设计引物，通过PCR获得编码突变体的重组质粒，将含有重组质粒的枯草芽孢杆菌种子培养液接种到发酵培养基，在30～40℃、150～250rpm条件下发酵时间36h～72h；所述发酵培养基组成为：葡萄糖10～20g/L，NaNO35～10g/L，MgSO4·7H2O0.5g/L，Na2HPO49.52g/L，KH2PO40.6g/L，FeSO4·7H2O0.0025g/L，pH自然；木糖诱导浓度为0.1～1.0%（w/w）。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，表达宿主优选枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WSHDZ-01、B.subtilis WB600或巨大芽孢杆菌。
9.权利要求1所述突变体在纺织、造纸、食品、医药中的应用。
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