[发明专利]一种姬松茸复合多糖的制备方法及其产品

说明书

技术领域

本发明属于保健食品加工技术领域，具体涉及一种姬松茸复合多糖的制备方法。

背景技术

姬松茸(agaricus blazeimurill，ABM)，又称巴西蘑菇、小松菇、柏氏蘑菇，属担子菌亚门层菌纲伞菌目蘑菇(黑伞)科蘑菇(黑伞)属，是一种食药兼用的名贵真菌。原产于美国加利福尼亚州南部、佛罗里达州海边草地、巴西东南部圣保罗市周边的草原以及秘鲁等国。姬松茸过去常作为治疗癌症、糖尿病和高胆固醇的药物，因为其富含免疫调节和抗肿瘤活性物质。

近年来，国内外研究人员对姬松茸提取物及作用机理进行了大量的研究。姬松茸多糖是使其具有药用功效的主要生物学活性物质。据日本东京大学医学部国立癌症研究中心报道，姬松茸活性多糖的抗癌作用明显高于其它11种已知具有抗癌作用的大型真菌。研究表明，姬松茸子实体沸水提取物不但具有刺激小鼠T细胞和巨噬细胞分泌白细胞介素IL-lβ和IL-6的作用，而且能刺激小鼠产生大量抗体。姬松茸多糖可刺激小鼠淋巴细胞分泌免疫球蛋白IgG和lgM，白细胞介素IL-6、IL-2和IL-4及干扰素IFN，从而提高了小鼠的免疫功能。进一步研究表明，姬松茸多糖可促进免疫器官的增殖，延缓其衰退，促进迟发型超敏反应的发生，能增强巨噬细胞的吞噬功能。因此，姬松茸多糖可以通过增强非特异性免疫和促进细胞免疫来发挥作用。姬松茸多糖的抗肿瘤活性，存在浓度和时间的依赖性。随着姬松茸多糖添加量的增多和作用时间的延长，其对肿瘤的抑制作用也加强。

从姬松茸中提取的多糖，常含有蛋白质组分。采用热水浸提法对姬松茸子实体进行分离纯化，从红外光谱和高压液相层析测定，其中一种成份是α-型吡喃环多糖，相对分子量为52500，气相色谱分析表明，其单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖及少量阿拉伯糖。通过分级醇沉和凝胶过滤法从姬松茸子实体中分离出3种成份：ABM-I、ABM-II及ABM-Ⅲ，其分子量分别为>2.0×10⁶、1.4×10⁶和3.8×10⁵，对ABM-I组分的结构进行完全酸水解和光谱法分析，表明其含有少量结合蛋白，其主链为α型1→6-D-吡喃葡聚糖。姬松茸多糖主要由α构型构成，只有少量β构型。其主链部分主要由1→6-Gal、1→6-Glc、1→2，6-Gal构成，分支点糖残基是1→2，6-Gal。1→Man、1→Gal形成主链的非还原末端，支链为1→6-Glc、1→6-Gal、1→6-Man及少量1→3-Man、1→2-Gal，该多糖能够提高小鼠的免疫功能。

真菌多糖的获得方法一般分两种：一是从固体培养的子实体中提取；二是通过液体发酵获得。目前国内外对姬松茸多糖的研究主要集中在子实体提取，近几年来，相继有学者在液体深层发酵方面进行了研究。相对于从子实体提取多糖，液体深层发酵具有以下几方面的优势：1)生产成本低，原料来源广，2)生产迅速，生产周期大为缩短；3)生产过程不受地域性及季节性限制，劳动强度小，可进行工业化生产；4)有效减少污染，由于食用菌栽培过程中会富集重金属，导致重金属超标。邹积宏等对不同来源的姬松茸菌体多糖含量进行了比较，发现采用深层发酵法培养姬松茸菌丝体提取出的多糖含量比鲜品子实体、干品子实体所得到的多糖含量要高（黑龙江医药，2008），表明液体发酵能够大规模生产姬松茸多糖，实现工业化生产。

多糖的药效活性与其分子结构和分子量水平密切相关。研究表明较大分子量（200万左右）和较小分子量（1万-5万）的姬松茸多糖均有较高的肿瘤抑制率（Takashi,Agric Biol Chem,1990）。因此，了解姬松茸子实体多糖的分子量情况及各段分子量多糖的质量分布情况对其大规模的开发生产有着非常大的参考价值。比较不同来源的姬松茸粗多糖的HPLC谱图发现，菌丝体多糖和胞外多糖中分子量小的组分含量相对较高，而子实体粗多糖中分子量大的组分含量较高（孙培龙，浙江大学博士论文，2007）。因此，开发一种包含各级分子量多糖成分的姬松茸复合多糖，对于开发姬松茸多糖在医药领域和保健品行业中的应用具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种姬松茸复合多糖的制备方法，通过该方法制备的各级分子量范围内多糖成份均匀的姬松茸复合多糖，能广泛应用于医药领域和保健品行业中。

为达到上述目的，本发明的技术方案是：

一种姬松茸复合多糖的制备方法，包括以下步骤：

（1）利用液体深层发酵培养姬松茸菌丝体，从培养的姬松茸菌丝体中提取多糖A；