[发明专利]基于组织因子的肿瘤多肽疫苗、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种基于组织因子的肿瘤多肽疫苗，其活性成分为将人源TF基因中的包含表位靶点的DNA序列片段表达后形成的AnsB-TF表位靶点融合蛋白，其中包含的TF表位靶点多肽片段为位于TF蛋白表面的易引起免疫反应的多肽片段。

2.根据权利要求1所述的肿瘤多肽疫苗，其特征在于：所述TF表位靶点多肽片段的序列为：GDWKSKCFYTTDTECDLTDE（SEQ ID NO：1）。

3.根据权利要求2所述的肿瘤多肽疫苗，其特征在于：所述疫苗在AnsB的C端加入一个25肽的破伤风毒素T细胞辅助表位TTP作为支臂，在TTP之后又加了一个3肽的柔性接头Ser-Gly-Thr，TF表位靶点多肽片段接于柔性接头后，形成AnsB-TTP -TF的结构，其序列见SEQ ID NO：2。

4.权利要求1、2或3所述的基于组织因子的肿瘤多肽疫苗的制备方法，其步骤包括：将人源包含TF表位靶点的DNA序列片段插入AnsB下游，获得相应的重组基因工程菌；重组基因工程菌经发酵后在大肠杆菌中表达出AnsB-TF表位靶点融合蛋白，经纯化后得到基于组织因子的肿瘤多肽疫苗。

5.根据权利要求4所述的肿瘤多肽疫苗的制备方法，其特征在于：其步骤包括：

（1）用加端PCR的方法在AnsB-TTP序列后加入人源TF基因中的包含表位靶点的DNA序列，获得AnsB-TTP-TF序列；

（2）构建重组质粒pET28-ansB-TTP-TF；

（3）将重组质粒pET28-ansB-TTP-TF转化到感受态的大肠杆菌中，经筛选后的阳性菌活化培养；

（4）裂解菌体后分离提纯，得到AnsB-TF表位靶点融合蛋白。

6.权利要求1、2或3所述的基于组织因子的肿瘤多肽疫苗在制备预防和治疗黑色素瘤药物中的应用。

7.权利要求1、2或3所述的基于组织因子的肿瘤多肽疫苗在制备预防和治疗乳腺癌、前列腺癌、胃癌、胰腺癌或肺癌药物中的应用。