[发明专利]一种禽用复合益生菌制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种禽用复合益生菌制剂，同时还涉及该制剂的制备方法，属于微生物制剂技术领域。

背景技术

随着集约化养殖业的发展，禽类的各种疾病不断发生，而且日益严重。目前防治禽类疾病的主要手段是使用抗生素，但抗生素的使用容易导致细菌耐药的产生及禽类产品中药物的残留。因此，预防禽类的疾病发生，解决其副产品中药物的残留是亟待解决的问题。

益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，可以改善宿主体内的微生态平衡，发挥有益作用。益生菌的作用特点是形成生物保护膜防止致病菌入侵；产生乳酸或醋酸、过氧化氢、细菌素和类似抗菌素的物质，并以此来抑制病原菌的生长，调整宿主免疫反应，改善消化道细菌代谢病降低粪中有害酶的活性；减少细菌易位的发生率等，因此益生菌具有加强肠道微生物区域的屏障功能或增进非特异性免疫功能，调节特异性免疫功能，增强抗病力和体质，防治病菌感染，提高饲料利用率和动物生长率的功能。因此对不同益生菌进行搭配，提高它们的作用成为研究热点。

发明内容

本发明的目的是提供一种禽用复合益生菌制剂，能够调节肠道的微生态环境，抑制肠道病原菌的生长，增强机体免疫力，提高饲料利用率。

本发明的目的还在于提供一种禽用复合益生菌制剂的制备方法。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是提供一种禽用复合益生菌制剂，将枯草芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、粪肠球菌菌液、嗜酸乳杆菌菌液、酪酸梭菌菌液按体积比20-40:5-20:10-30:12-35:15-30混合，然后加入羧甲基纤维素制成混悬液，再将混悬液加入硫酸铝溶液中，形成凝聚囊，过滤得到凝聚囊，水洗后干燥即得；上述菌种菌液中的活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

所述禽用复合益生菌制剂中活菌总数不低于5×10⁹CFU/g。

本发明所采用的技术方案还在于提供一种禽用复合益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、粪肠球菌菌液、嗜酸乳杆菌菌液、酪酸梭菌菌液按体积比混合，然后加入混合菌液质量0.5-1%的羧甲基纤维素制成混悬液，再将混悬液加入混悬液体积1-2倍的质量分数3-5%的硫酸铝溶液中，形成凝聚囊，过滤得到凝聚囊，水洗，干燥得到禽用复合益生菌制剂；上述菌种菌液中的活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酪酸梭菌菌液的制备方法包括以下步骤：

（1）菌种的活化：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酪酸梭菌分别接种到营养肉汤培养基中，在37℃、180-200r/min条件下培养12-14h；

（2）以3%接种量将活化的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酪酸梭菌分别接入液体培养基，在37℃条件下通氧发酵培养36-48h，过滤然后将发酵液3000-4000r/m离心5-10min，倒去上清液，加入无菌水制得枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酪酸梭菌菌液，所得菌液中活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

所述液体培养基包括以下质量分数的组分：葡萄糖0.1%、淀粉0.2%、豆粕水解液2%、磷酸二氢钾0.3%、磷酸氢二钾0.2%，硫酸镁0.05%、氯化铁0.01%、碳酸钙0.01%。

所述粪肠球菌菌液的制备方法包括以下步骤：

（1）菌种的活化：将粪肠球菌接种到营养肉汤培养基中，在37℃条件下静止培养12-14h；

（2）以2%接种量将活化的粪肠球菌接入MRS培养基，在37℃条件下静置发酵培养24-36h，然后将发酵液3000-4000r/m离心5-10min，倒去上清液，加入无菌水制得粪肠球菌菌液，所得菌液中活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

所述MRS培养基包括以下质量分数的组分：胰蛋白胨1%、酵母浸粉0.5%、葡萄糖1%、蔗糖0.5%、醋酸钠1.5%、柠檬酸铵0.2%、磷酸二氢钾0.4%、硫酸锰0.05%、硫酸镁0.02%、硫酸铁0.003%、吐温800.1%。

所述嗜酸乳杆菌菌液的制备方法包括以下步骤：

（1）菌种的活化：将嗜酸乳杆菌接种到营养肉汤培养基中，在37℃条件下静止培养12-14h；

（2）以2%接种量将活化的嗜酸乳杆菌接入发酵培养基，在37℃条件下静置发酵培养24-36h，然后将发酵液3000-4000r/m离心5-10min，倒去上清液，加入无菌水制得嗜酸乳杆菌菌液，所得菌液中活菌数均不低于10⁹CFU/ml。