[发明专利]一种禽用复合益生菌制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种禽用复合益生菌制剂，其特征在于，将枯草芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、粪肠球菌菌液、嗜酸乳杆菌菌液、酪酸梭菌菌液按体积比20-40:5-20:10-30:12-35:15-30混合，然后加入羧甲基纤维素制成混悬液，再将混悬液加入硫酸铝溶液中，形成凝聚囊，过滤得到凝聚囊，水洗后干燥即得；上述菌种菌液中的活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

2.根据权利要求1所述的禽用复合益生菌制剂，其特征在于，所述禽用复合益生菌制剂中活菌总数不低于5×10⁹CFU/g。

3.一种如权利要求1所述的禽用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、粪肠球菌菌液、嗜酸乳杆菌菌液、酪酸梭菌菌液按体积比混合，然后加入混合菌液质量0.5-1%的羧甲基纤维素制成混悬液，再将混悬液加入混悬液体积1-2倍的质量分数3-5%的硫酸铝溶液中，形成凝聚囊，过滤得到凝聚囊，水洗，干燥得到禽用复合益生菌制剂；上述菌种菌液中的活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

4.根据权利要求3所述的禽用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酪酸梭菌菌液的制备方法包括以下步骤：

（1）菌种的活化：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酪酸梭菌分别接种到营养肉汤培养基中，在37℃、180-200r/min条件下培养12-14h；

（2）以3%接种量将活化的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酪酸梭菌分别接入液体培养基，在37℃条件下通氧发酵培养36-48h，过滤然后将发酵液3000-4000r/m离心5-10min，倒去上清液，加入无菌水制得枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酪酸梭菌菌液，所得菌液中活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

5.根据权利要求4所述的禽用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述液体培养基包括以下质量分数的组分：葡萄糖0.1%、淀粉0.2%、豆粕水解液2%、磷酸二氢钾0.3%、磷酸氢二钾0.2%，硫酸镁0.05%、氯化铁0.01%、碳酸钙0.01%。

6.根据权利要求3所述的禽用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述粪肠球菌菌液的制备方法包括以下步骤：

（1）菌种的活化：将粪肠球菌接种到营养肉汤培养基中，在37℃条件下静止培养12-14h；

（2）以2%接种量将活化的粪肠球菌接入MRS培养基，在37℃条件下静置发酵培养24-36h，然后将发酵液3000-4000r/m离心5-10min，倒去上清液，加入无菌水制得粪肠球菌菌液，所得菌液中活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

7.根据权利要求6所述的禽用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述MRS培养基包括以下质量分数的组分：胰蛋白胨1%、酵母浸粉0.5%、葡萄糖1%、蔗糖0.5%、醋酸钠1.5%、柠檬酸铵0.2%、磷酸二氢钾0.4%、硫酸锰0.05%、硫酸镁0.02%、硫酸铁0.003%、吐温800.1%。

8.根据权利要求3所述的禽用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌菌液的制备方法包括以下步骤：

（1）菌种的活化：将嗜酸乳杆菌接种到营养肉汤培养基中，在37℃条件下静止培养12-14h；

（2）以2%接种量将活化的嗜酸乳杆菌接入发酵培养基，在37℃条件下静置发酵培养24-36h，然后将发酵液3000-4000r/m离心5-10min，倒去上清液，加入无菌水制得嗜酸乳杆菌菌液，所得菌液中活菌数均不低于10⁹CFU/ml。

9.根据权利要求8所述的禽用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基包括以下质量分数的组分：葡萄糖3%、乳糖1%、脱脂乳粉5%、酵母浸粉0.8%、磷酸二氢钾0.3%、磷酸氢二钠0.4%、硫酸镁0.02%、硫酸锰0.008%。

10.根据权利要求4、6或8所述的禽用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述营养肉汤培养基包括以下质量分数的组分：蛋白胨1%、牛肉膏0.3%、氯化钠0.5%。