[发明专利]一种应用于核酸序列分析中的样品纯化方法在审
申请号: | 201310405339.5 | 申请日: | 2013-09-07 |
公开(公告)号: | CN104419760A | 公开(公告)日: | 2015-03-18 |
发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 上海毕欧桥生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200031 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 应用于 核酸 序列 分析 中的 样品 纯化 方法 | ||
1.一种应用于核酸序列分析中的样品前处理方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)将用功能基团改性的纳米磁珠溶液分散于待纯化的样品溶液中并混合均匀,在室温下培育5分钟;
(2)将混合溶液放置于磁力装置上2-3分钟;
(3)用移液器将混合溶液中的液体吸干后,再加入乙醇的水溶液,在室温下培育30秒,再将混合溶液中的液体吸干;
(4)再重复第3步1次;
(5)撤去磁力装置,向吸干液体的混合溶液剩余物中加入缓冲液,再混合均匀;
(6)将混合溶液放置于磁力装置上1分钟后,将混合溶液中的上清液吸取出来,可以直接在核酸序列分析仪上进行检测。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中用功能基团改性的纳米磁珠溶液与待纯化的样品溶液中的体积比为1:1-3:1,用功能基团改性的纳米磁珠溶液的浓度为10mg/mL-100mg/mL。
3.磁珠的直径为50-500纳米,磁珠的组分和重量含量百分比为:氧化钆20-50%,四氧化三铁20-40%,二氧化硅:10-60%。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,磁力装置的磁场强度为0.1-1特斯拉。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,乙醇水溶液的体积浓度为50%-95%。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(5)中,加入缓冲液与待纯化的样品溶液的体积比1:2-1:4,缓冲液的主要成分为水,三羟甲基氨基甲烷和氯化氢;三羟甲基氨基甲烷和氯化氢的摩尔比为1;1,pH值在7-9,浓度为0.005-0.05mol/L。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(6)中,核酸序列分析仪是指ABI 310, 3100, 3730或 3730XL DNA测序仪,Illumina HiSeq 1000, HiSeq 2000, HiSeq 2500, HiSeq 3000, 或MySeq DNA测序仪,Megbase 1000 DNA测序仪。
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