[发明专利]从莫勒菌中提取5α,8α-环二氧-24(R)-甲甾-6,22-二烯-3β-醇的方法

权利要求书

1.一种从莫勒菌中提取甾体化合物5α, 8α-环二氧-24(R)-甲甾-6,22-二烯-3β-醇的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

1）将莫勒菌活化后，取菌块接种PDB培养基中，在120 r/min、26℃条件下连续培养7天，按10％接种量再次转接到PDB培养基中，继续在120 r/min、26℃条件下连续培养31天得发酵物； 

2）发酵物经抽滤得到菌丝体，菌丝体在35℃下恒温干燥后，用甲醇浸提后旋蒸浓缩至干，用水溶解后用乙酸乙酯萃取，将乙酸乙酯萃取液浓缩得浸膏；

3）将浸膏上200~300目硅胶柱，进行粗分；分别以石油醚：二氯甲烷=(3:1, 2:1, 1:1)减压硅胶柱洗脱；

4）将3）中得到的石油醚：二氯甲烷1:1洗脱成分,经减压浓缩后上200~300目硅胶柱，以石油醚：乙酸乙酯体积比=5:1等度洗脱，经TLC分析，收集相同Rf值相同的洗脱液，旋蒸浓缩。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）中接种菌块的大小为0.5×0.5cm，接种量为5块。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2）中浸提要用1-3倍体积甲醇浸提48小时，每8小时超声20分钟。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于步骤2）中具体操作为：发酵物经抽滤得到菌丝体，菌丝体在35℃下恒温干燥后，用甲醇浸提后旋蒸浓缩至干，用200mL水溶解后与乙酸乙酯按体积比1：1.5混合，倒入分液漏斗中，摇瓶萃取菌液3~5次，每次5～10min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4)中石油醚：乙酸乙酯体积比=5:1等度洗脱，收集TLC分析中以石油醚：丙酮=3：1为展开剂时R_f值为0.2-0.3的组分。