[发明专利]紫红曲霉YH-6菌株及其用途和由该菌株制备的酯化红曲

说明书

技术领域：

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及酿酒领域中的紫红曲霉菌YH-6菌株及其用途和由该菌株制备的酯化红曲。

背景技术：

红曲霉在生长过程中能产生多种酶类，如淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、果胶酶、酯化酶等。自上世纪80年代以来，酿酒界对红曲霉进行了广泛的探索和应用研究，取得了突破性的进展和良好的经济效益。红曲霉种类较多，其中酯化红曲主要由烟灰色红曲霉和紫红曲霉制成，红曲霉胞外脂酶具有较强的催化己酸乙酯合成的能力，被称为红曲酶胞外己酸乙酯合成酶。酯化红曲（红曲霉的生物制剂）作为一种生物催化剂，在浓香型白酒发酵过程中具有重要的作用。

酯化红曲作为强化大曲菌种在产酯生香方面具有明显的优势，为提高白酒中己酸乙酯、乙酸乙酯等酯类物质的形成起到了不可替代的作用。因此，酯化红曲的使用对提高己酸乙酯的含量，提高基酒优质品率效果明显，经济效益显著。此外，酯化红曲应用于黄水处理，可降低污水处理成本，可以实现对酿酒副产物资源的再利用，使黄水中的COD、BOD含量在原有基础上下降80％，并获得一定经济效益。再者，酯化红曲对提升二级酒的档次提供重要的技术支持。二级酒中含有大量的有机酸和醇类，酯化红曲可以催化二级酒中的有机酸与醇类的酯化合成反应，促进酒中酯类化合物的形成，从而改善二级酒的口味和品质，增加优级酒的产量。

虽然距酯化红曲的发现已经有相当长的时间，不同的研究机构和酿酒企业都开展了酯化红曲的研究，但实际大规模的生产应用在国内还很少，同时，现有的酯化红曲存在着酯化率低的问题也没有到很好解决，本发明将促进酯化红曲的大规模推广和应用。

发明内容

   本发明的要解决的技术问题是提供一种紫红曲霉YH-6菌株及其用途和由该菌株制备的酯化红曲，用该菌株制备的酯化红曲能促进曲酒中以己酸乙酯为主的四种酯的合成，缩短曲酒的发酵周期，提高曲酒的优质品率。

本发明的紫红曲霉（Monascus purpureus）YH-6菌株是从洋河酒厂股份有限公司自制的大曲中分离得到的，该菌株于2013年 7 月 17 日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏（地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101），保藏号：CGMCC No.7959。

本发明通过以下技术方案实现：

一种紫红曲霉菌（Monascus purpureus）YH-6，保藏号为：CGMCC No.7959 。

用上述的紫红曲霉菌（Monascus purpureus）YH-6制备的酯化红曲。

上述的紫红曲霉菌或酯化红曲在曲酒发酵中的用途。

所述酯化红曲制备包括以下步骤：

（1）将1 g大曲粉加入装有 50 mL 富集培养基的250 mL 三角瓶中，在32 ℃下, 100 r/ m 富集培养96 h，移取 5 mL 培养液至另一盛有富集培养基的三角瓶中连续2次富集。富集 3 次后，稀释涂布选择性筛选平板，选取菌落颜色为红色，同时，透明圈透明清晰，透明圈直径与菌落直径比值较大的菌落划线分离，纯化得到纯菌株；将纯化后的菌株储存于麦芽汁固体培养基斜面上，4 ℃冰箱保存；

（2）将步骤（1）低温保存的菌种，用接种针挑取少许接种于100 mL 液态发酵培养基中100 r/m培养96 h，使菌丝球个数达到饱和；

（3）将步骤（2）的菌液以5 %的接种量接入固态培养基，32 ℃静置培养20天，制成酯化红曲。

所述富集培养基、液体发酵培养基分别为：麦芽汁培养基，自然pH，115 ℃灭菌20 min，然后再加乙醇5 %和灭过菌的乳酸 4 ‰。

选择性平板培养基：在100 mL麦芽汁培养基中，加溴甲酚紫0.004 g，三丁酸甘油酯1.5%，琼脂2 %，自然pH，115 ℃灭菌20 min。

所述固态培养基为麸皮培养基：麸皮100 g，乳酸0.4 mL，葡萄糖0.5 g，蛋白胨1.5 g，KH₂PO₄ 0.1 g，MgSO₄.7H₂O 0.1 g，水70 mL，115 ℃灭菌20 min后加乙醇5 mL。

菌种筛选步骤：

通过上述步骤（1）得到纯菌株10株。将纯化后的菌株储存于麦芽汁固体培养基斜面上，4 ℃冰箱保存。