[发明专利]活版式组织芯片制备方法及制备仪器

说明书

技术领域

本发明涉及生物和医学领域中一种重要的实验方法及装置，尤其是涉及一种活版式组织芯片制备方法及制备仪器。

背景技术

组织的阵列，也称为组织微阵列（TMAS），即在一个单一的受体块{接收块}或石蜡块上放有多个不同的组织样本。用切片机将受体块{接收块}按通常方法进行切片，得到标本。

组织微阵列技术是一项重大的实验技术革新，临床病理学家和生物学家利用阵列生物组织和病理标本的切片进行分析，获得高通量生物组织和病理标本状况及变化的关键信息。

通过利用组织芯片，科学家们研究了组织或（和）细胞结构的信息，细胞的功能和表型、亚细胞的基因表达、及蛋白定位和定量表达等问题。

借助组织微阵列技术，可将大量的组织和病理标本整合到一张芯片上，从而使实验室具备规模化组织化学及标准化组织病理检测方法。这种新的技术广泛适用于高通量组织表型检测、大规模药物筛选、配体以及其它生物反应测试等。

组织阵列的制造是非常耗时的，这是由于制作过程中需要使用中空的取样针从各种组织或样本块，冲压制备组织芯，逐一修整组织芯后，再将组织芯按既定顺序放置在同一个受体块里。有时样本组织数目较多时，这种重复性操作非常费时费力。

现有的组织芯片的制作技术绝大部分采用取样针操作，这种方法存在如下不足：取样针采样多以盲穿方式获得组织芯，取样点定位不准确，存在样本代表性不高；采样针取样以环转方式取样，尽管对供体组织块或蜡块影响较小，但难以保证所取组织芯的完整性，制备的蜡芯中组织压缩、变形、断裂等问题严重；另外取样针所取样深度不易控制，尽管现有机械取样装置能精确控制穿刺深度，但对于较薄的样品取样时，可能导致蜡芯前端为空白蜡芯，因此制备得组织芯片中组织芯不位于同一平面，切片后的芯片出现空位点，降低了芯片制备效率，不便于较薄、及上皮和囊壁等组织样品的展示。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：解决上述现有技术存在的问题，而提供一种活版式组织芯片制备方法及制备仪器，机械化自动化操作，定位准确，省时省力，误差小，样品组织极向性易于标识和识别，样品组织损伤小，单一芯片包含多种标本或样品组织信息。

本发明采用的技术方案是：

一种活版式组织芯片制备仪器，由切割模块、微型线切割机、受体蜡模、进给工作台四部分连接组成；所述的切割模块为底板上安装切割模板、夹紧螺钉和铡刀，在底板上还加工有定位孔和缺角；所述的受体蜡模安装在托盘上，托盘上加工有定位销孔，受体蜡模为整个蜡块上预制有多个略大于蜡芯的空孔，空孔有序排列；所述的进给工作台包括横向步进电机、纵向步进电机、编码器、导轨和滚珠丝杆，步进电机连接驱动滚珠丝杆，滚珠丝杆再连接驱动导轨，导轨与托盘连接固定，或者导轨与切割模块的底板连接固定。

一种基于上述活版式组织芯片制备仪器的活版式组织芯片制备方法，其具体方法为：

1）受体蜡模的制备：

上模为阳模，下模为阴模，制造受体蜡模时，先通过热台或恒温孵箱将蜡模预热至56℃。将预热后上、下模合上，再从两边的浇蜡口同时快速注入融化后的蜡液,然后轻微振荡下模，使得蜡液能充分的注满下模，下模注满蜡水后，将上、下模具在室温下保持静止，待蜡充分冷却凝固后拔出上模，从而得到受体蜡模，再按预先设计的顺序，将受体蜡模的每一个空孔进行二位编码，并记录下来；

2）蜡芯的制备：

第一步，从包埋盒里取出供体蜡块放置于切割模板上，使得供体蜡块的两边与切割模板右边和前边相接触；

第二步，将夹紧螺钉旋下，并在夹紧螺钉正下方各放一张方形塑料薄片，便于夹紧螺钉将供体蜡块夹紧；

第三步，由于供体蜡块边缘部分不含样本组织，于是使用薄且锋利的铡刀将其边缘部分切除，相比直接使用线切割大大提高工作效率；

第四步，铡刀切除边缘部分后，对含有样本组织的核心部分做好样品组织的标示，并记录下来，方便后续辨识；

第五步；使用微型线切割机沿着切割模块上的缺角走丝，从而切下横截面与缺角部分大小尺寸一致的蜡芯；

3）向受体蜡模置入蜡芯：

第一步，将制备好的受体蜡模放入托盘中，并将托盘与进给工作台装配连接，或者将切割模块与进给工作台装配连接；

第二步，通过定位销钉将切割模板上的缺角与受体蜡模位于第一排、第一列的空孔对准，准确定位；由此类推，此后拔出其中一个销钉，移动另一个销钉，使得缺角与第一排或者第一列的另一空孔一一对齐；