[发明专利]活版式组织芯片制备方法及制备仪器

权利要求书

1.一种活版式组织芯片制备仪器，其特征在于：由切割模块、微型线切割机、受体蜡模、进给工作台四部分连接组成；所述的切割模块为底板上安装切割模板、夹紧螺钉和铡刀，在底板上还加工有定位孔和缺角；所述的受体蜡模安装在托盘上，托盘上加工有定位销孔，受体蜡模为整个蜡块上预制有多个略大于蜡芯的空孔，空孔有序排列；所述的进给工作台包括横向步进电机、纵向步进电机、编码器、导轨和滚珠丝杆，步进电机连接驱动滚珠丝杆，滚珠丝杆再连接驱动导轨，导轨与托盘连接固定，或者导轨与切割模块的底板连接固定。

2.一种基于权利要求1所述的活版式组织芯片制备仪器的活版式组织芯片制备方法，其特征在于：其具体方法为： 

1）受体蜡模的制备：

上模为阳模，下模为阴模，制造受体蜡模时，先通过热台或恒温孵箱将蜡模预热至56℃；

将预热后上、下模合上，再从两边的浇蜡口同时快速注入融化后的蜡液,然后轻微振荡下模，使得蜡液能充分的注满下模，下模注满蜡水后，将上、下模具在室温下保持静止，待蜡充分冷却凝固后拔出上模，从而得到受体蜡模，再按预先设计的顺序，将受体蜡模的每一个空孔进行二位编码，并记录下来；

2）蜡芯的制备：_---------

第一步，从包埋盒里取出供体蜡块放置于切割模板上，使得供体蜡块的两边与切割模板右边和前边相接触；

第二步，将夹紧螺钉旋下，并在夹紧螺钉正下方各放一张方形塑料薄片，便于夹紧螺钉将供体蜡块夹紧；

第三步，由于供体蜡块边缘部分不含样本组织，于是使用薄且锋利的铡刀将其边缘部分切除，相比直接使用线切割大大提高工作效率；

第四步，铡刀切除边缘部分后，对含有样本组织的核心部分做好样品组织的标示，并记录下来，方便后续辨识；

第五步；使用微型线切割机沿着切割模块上的缺角走丝，从而切下横截面与缺角部分大小尺寸一致的蜡芯；

3）向受体蜡模置入蜡芯：

第一步，将制备好的受体蜡模放入托盘中，并将托盘与进给工作台装配连接，或者将切割模块与进给工作台装配连接；

第二步，通过定位销钉将切割模板上的缺角与受体蜡模位于第一排、第一列的空孔对准，准确定位；由此类推，此后拔出其中一个销钉，移动另一个销钉，能使得缺角与第一排或者第一列的另一空孔一一对齐；

第三步，通过线切割方法切割供体蜡块制备的蜡芯，在切割完毕后，依靠自身重力垂直落下，或操作植入事先与缺角对齐的受体蜡模的空孔内，每个空孔，只植入一个蜡芯；

第四步，当与切割模板上缺角对齐的空孔植入蜡芯后，操作步进电机使得工作台横向或者纵向进给，进给距离与两相邻空孔中心之间长度相等，从而实现更换新的空孔与切割模板上缺角部分对齐；切换结束后，要立刻锁定进给操作手柄，重复上述操作使得受体蜡模每个空孔都植入蜡芯，植入的蜡芯都是事先标识过的样本组织，植入相应的空孔后将它们一一对应的关系建立数据库，以便后续查询；

4）切片：

第一步，受体蜡块与蜡芯初步融合：当受体蜡模里的所有空孔都植入了蜡芯后，将托盘放置于试验热台或孵箱中，56-60℃孵育融合，实时观察，待蜡块底部有蜡液溢出，及时转至室温固化；

第二步，蜡液准备：将包埋机中石蜡预热融化，将蜡液温度调整至68-72℃； 

第三步，植入蜡芯后蜡块的再次包埋：初步融合后，蜡块中可有空腔形成，且蜡块上半部分不整齐，不利于将含蜡芯的蜡块固定于切片机上完成切片；

再次包埋时，可将病理包埋机内的预热蜡液沿着托盘壁注入植满蜡芯的受体蜡模里，避免直接倒在蜡模上；

注入预热的蜡液时，轻微振荡托盘，使得蜡水完全注满受体蜡模，避免形成空腔；蜡液注入完毕后，将托盘保持静止置于室温条件下充分冷却至完全固化；

第四步，制片：将含有蜡芯的受体蜡模取出；

修整标记后，融合后蜡块固定于组织切片机上切片、制片，得到一个切片上含有的多种样本组织及具有的多种样本组织信息的芯片。