[发明专利]25羟-维生素D3定量免疫层析检测试剂卡及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及维生素免疫化学试验物质的制备，具体是一种25羟维生素D3定量免疫层析检测试剂卡及其制备方法。

背景技术

维生素D是环戊烷多氢菲类化合物，可由维生素D原经紫外线270~300nm激活形成。动物皮下7-脱氢胆固醇，酵母细胞中的麦角固醇都是维生素D原，经紫外线激活分别转化为维生素D3及维生素D2。维生素D的最大吸收峰为265nm，从食物中得来的维生素D，与脂肪一起吸收，吸收部位主要在空肠与回肠。胆汁帮助其吸收。脂肪吸收受干扰时，如慢性胰腺炎、脂肪痢及胆道阻塞都会影响吸收。吸收的维生素D与乳糜微粒相结合，由淋巴系统运输。当维生素D运到肝脏中，在微粒体中经单氧酶系统作用，将其25位羟基化形成25（OH）维生素D3，肝外的其他组织也可吸取维生素D及25（OH）D3，因此组织中维生素D及25（OH）D3及其总量比维生素D血浆中多，如果靶组织需要，可将其释放出来，他们在脂肪组织中最多，释放速度最慢，当体重减轻，脂肪减少时，他们也可释放出来。25-羟基维生素D3在肾线粒体单氧酶作用下（酶系统包括细胞色素p450、铁硫蛋白及黄素蛋白），经羧基化，转变为1，25（OH）-D3，这是维生素D的生物作用形式，现将其作为激素看待，其作用方式与其他固醇类激素相似。

维生素D缺乏会导致少儿佝偻病和成年人的软骨病。症状包括骨头和关节疼痛，肌肉萎缩，失眠，紧张以及痢疾腹泻。维生素D主要用于组成和维持骨骼的强壮。它被用来防治儿童的佝偻病和成人的软骨症，关节痛等等。患有骨质疏松症的人通过添加合适的维生素D和镁可以有效的提高钙离子的吸收度。除此以外，维生素D还被用于降低结肠癌、乳腺癌和前列腺癌的机率，对免疫系统也有增强作用。

测定血液中25-羟基维生素D3能反应机体的维生素D状况，以为利于后续的干预治疗。由于维生素D是小分子物质，采用免疫学方法检测最佳的方法为竞争抑制法。目前，市场上已有采用化学发光等方法检测25-羟基维生素D3的试剂卡出现，然而，运用胶体金免疫层析技术定量检测25-羟基维生素D3的试剂尚为空白。

发明内容

本发明是为了解决应用免疫层析胶体金法检测人血液中25-羟基维生素D3的技术问题，而提供一种25-羟基维生素D3定量免疫层析检测试剂卡及其制备方法。   

实现本发明的原理如下：利用胶体金标记抗体，在检测试纸条的NC膜上包被配对抗原。检测时当样品中含相应的抗原时，胶体金标记的抗体和样品中相应抗原相结合形成复合物，然后在NC膜上层析，再遇到包被抗原时，不会和包被的抗原结合或仅部分结合，不形成肉眼可见的或仅形成强度减弱的T线，在一定的条件下，T线的强弱和样品中的浓度呈负相关。采用专用的免疫层析结果判读记录仪可以实现定量检测。

本发明是按照以下技术方案实现的。

一种25-羟基维生素D3定量免疫层析检测试剂卡，包括依次形成有稀释液孔、加样孔和观察窗的盒盖，盒体内底部形成的检测试纸条架一端形成有端护栏，另一端形成有侧护栏，盒盖底面形成的插突起与盒体的插孔柱插接结合；以及沿检测试纸条架长度方向平铺的检测试纸条，检测试纸条的塑料基板两端分别设置的样品垫和吸样垫，而样品垫和吸样垫之间依次设置有胶体金标记25-羟基维生素D3抗体的胶体金垫，分别包被有25-羟基维生素D3-偶联蛋白的T线和抗鼠IgG的C线的NC膜。

一种25-羟基维生素D3定量免疫层析检测试剂卡的制备方法，包括依次形成有稀释液孔、加样孔和观察窗的盒盖，盒体内底部形成的检测试纸条架一端形成有端护栏，另一端形成有侧护栏，盒盖底面形成的插突起与盒体的插孔柱插接结合；以及沿检测试纸条架长度方向平铺的检测试纸条，检测试纸条的塑料基板两端分别设置有样品垫和吸样垫，而样品垫和吸样垫之间依次设置有含有胶体金标记的25-羟基维生素D3抗体的胶体金垫，分别包被有25-羟基维生素D3-偶联蛋白的T线和抗鼠IgG的C线的NC膜；

所述样品垫和吸样垫之间依次设置有含有胶体金标记的25-羟基维生素D3抗体的胶体金垫，分别包被有25-羟基维生素D3-偶联蛋白的T线和抗鼠IgG的C线的NC膜，其中：