[发明专利]人去唾液酸糖蛋白受体单克隆抗体及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种特异性地识别和结合人去唾液酸糖蛋白受体(Asialoglycoprotein Receptor，ASGPR)胞外段的单克隆抗体、其制备方法及其应用。

背景技术

去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor，ASGPR)，又称肝凝集素或肝糖凝集蛋白，特异性表达于哺乳动物肝窦状隙和基底外侧的肝实质细胞表面，主要生理功能为清除外周血循环中含有D-半乳糖残基或N-乙酰半乳糖胺残基的糖蛋白、脂蛋白和凋亡细胞。ASGPR独特的生理功能及其高度的肝细胞特异性，使其在肝细胞癌和转移性肝癌的鉴别、循环肝癌细胞的分离和检测、肝脏成像以及肝脏药物或基因的靶向递送等方面具有重要的基础研究意义和潜在的临床应用价值。

近年来已有人利用ASGPR1全长基因[Trahtenherts A,Benhar I.An internalizing antibody specific for the human asialoglycoprotein receptor.Hybridoma(Larchmt),2009,28:225-233.]、ASGPR大亚基异构体蛋白H1b[刘嘉,丁红晖,杨燕,胡斌,余源,黄红平,等.抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b多克隆抗体的制备和鉴定.细胞与分子免疫学杂志,2009,10:917-919.]、ASGPR大亚基糖识别区基因[Zhao X,Yu Z,Dai W,Yao Z,Zhou w,Cao L,et al.Construction and functional characterization of an anti-asialoglycoprotein receptor single-chain variable-fragment-targeted melittin.Biotechnol Appl Biochem,2011,58:405-411.]、ASGPR基因片段[Park JH,Kim KL,Cho EW.Detection of surface asialoglycoprotein receptor in hepatic and extra-hepatic cells using a novel monoclonal antibody.Biotechnol Lett,2006,28:1061-1069.]等制备ASGPR抗体。遗憾的是，只是在近期唯有Santa公司的单克隆抗体可以商购到[美国santa cruz生物公司，http://www.scbt.com/table-asgpr.html]，且仅有一款针对ASGPR1全长序列的小鼠单克隆抗体[sc-52623]。然而，关于这些抗体的应用研究鲜见报道。而Santa公司出售的抗体适用范围有限，无法满足临床应用的需要。

因此，本领域有必要进一步开发特异性良好的ASGPR单克隆抗体，以期实现ASGPR应用价值的临床转化。

发明内容

本发明的目的在于提供人去唾液酸糖蛋白受体单克隆抗体及其制备和应用。

在本发明的第一方面，提供一种单克隆抗体，其是由保藏号为CCTCC NO:C201370的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体。

在一个优选例中，所述的单克隆抗体是免疫球蛋白同种型IgG1型。

在另一优选例中，所述的单克隆抗体以SEQ ID NO:1所示的抗原免疫动物制备获得。

在本发明的另一方面，提供一种杂交瘤细胞株，其在中国典型培养物保藏中心的保藏号是CCTCC NO:C201370。

在本发明的另一方面，提供一种免疫偶联物，所述免疫偶联物包括：所述的单克隆抗体以及与之连接的标记物；所述的标记物选自(但不限于)：辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、生物素或荧光素。

在本发明的另一方面，提供一种检测试剂盒，其中包括：

所述的单克隆抗体；或

所述的杂交瘤细胞株；或

所述的免疫偶联物。

在一个优选例中，所述的试剂盒中还包括：

第二抗体，所述的第二抗体特异性识别所述的单克隆抗体；

免疫磁珠；

显色剂；

洗涤液；和/或

终止液。

在本发明的另一方面，提供所述的单克隆抗体的用途，用于制备特异性检测人去唾液酸糖蛋白受体的检测试剂或试剂盒。

在一个优选例中，所述的检测人去唾液酸糖蛋白受体包括：(1)定性检测人去唾液酸糖蛋白受体；或(2)定量检测人去唾液酸糖蛋白受体。