[发明专利]一种快速检测中药复方制剂中指标性成分含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药质量检测领域，涉及一种快速检测中药复方制剂中指标性成分含量的方法，尤其是一种中药复方制剂防己黄芪汤指标性成分含量的快速检测方法。 

背景技术

中药复方制剂防己黄芪汤出自《金匮要略》,张仲景“金匮要略·水气病篇”有皮、风水,说:“皮水为病,四肢肿,水气在皮肤中,四肢聂聂动者,防己黄芪汤主之。”该方为风湿在表，卫虚不固而症见脉浮身重，汗出恶风而设。全方主要由防己、黄芪、白术、甘草组成，有益气固表，健脾渗湿之功效。临床加减可用于治疗风湿性心脏病、风湿性关节炎、慢性肾炎和慢性肾小球肾炎等病症，此外在骨伤科方面也有临床运用。 

所述的防己黄芪汤方中以防己祛风行水；黄芪益气固表,且能行水消肿,两者配伍,祛风不伤表,固表不留邪,且又行水气,而共为君药；臣以白术补气健脾祛湿,与黄芪为伍则益气固表之力增,与防己相配则祛湿行水之功倍；使以甘草,培土和中,调和药性；诸药相合,共奏益气祛风,健脾利水之效,使风邪得除,表气得固,脾气健旺,水湿运化,于是风水,风湿之表虚征,悉得痊愈。 

现有技术公开了中药黄芪，补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，毛蕊异黄酮葡萄糖苷是其药材含量测定的指标性成分之一，文献如2010年《中华人民共和国药典》：283-284。 

中药防己祛风止痛，利水消肿，防己诺林碱和粉防己碱是其药材 含量测定的指标性成分，文献如2010年《中华人民共和国药典》：139-140。 

中药甘草补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药，甘草苷和甘草酸是其药材含量测定的指标性成分，文献如2010年《中华人民共和国药典》：80-81。 

目前，尚无全面控制中药复方制剂防己黄芪汤其质量的检测方法，现有技术中，仅能对该复方制剂中的某几种成分或2种成分采用高效液相色谱分别进行含量测定，来片面地反映防己黄芪汤的质量，如李伟等[防己黄芪颗粒的提取工艺研究.中药新药与临床药理.2006,17(2):137-154）]采用高效液相色谱-紫外检测测定防己黄芪颗粒中防己诺林碱和粉防己碱的含量，采用HPLC-ELSD检测测定防己黄芪颗粒中黄芪甲苷的含量。所述的检测方法尚不能对防己黄芪汤的质量的优劣进行全面有效地衡量。鉴于此，本申请的发明人拟建立一种检验效率高、定量准确的检测方法，以满足防己黄芪汤指标性成分含量的快速检测，进一步全面有效地衡量该复方制剂的质量。 

发明内容

本发明的目的是提供一种快速检测中药复方制剂中指标性成分含量的方法，尤其是一种快速检测中药复方制剂防己黄芪汤指标性成分含量的方法。本检测方法能一次性地快速检测所述复方制剂中的5种成分，可进一步全面有效地衡量该复方制剂的质量，弥补现有技术的不足。 

本发明在对防己黄芪汤的组方进行研究分析的基础上，确定了该中药复方制剂的指标性成分，其中的黄芪和防己为方中首要的、针对主病起主要治疗作用的君药，毛蕊异黄酮葡萄糖苷、防己诺林碱和粉防己碱在药材中含量较多，且为《药典》规定的检测指标，故选为指 标性成分；白术在《药典》中仅有定性检查苍术酮，文献报道的白术内酯与防己黄芪汤治疗的疾病关联度不大，故暂不列入指标性成分；甘草中甘草酸和甘草苷均有文献报道药理作用为抗炎镇痛，其与防己黄芪汤治疗的疾病联系紧密，列入指标性成分。 

具体的，本发明的一种快速检测中药复方制剂中指标性成分含量的方法，其特征在于，其包括步骤; 

(1)制备对照品溶液：分别取防己诺林碱、粉防己碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成含防己诺林碱、粉防己碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸的混合溶液作为对照品溶液; 

(2)制备防己黄芪汤提取浓缩液：防己、黄芪等药味先以10倍量70%乙醇回流提取2次，每次1.5h；再以12倍量水煎煮2次，每次1.5h，最后合并所有水提取液及醇提液，浓缩，浓缩为：0.8-1.3g浓缩液/g生药材； 

（3）制备供试品溶液:取防己黄芪汤提取浓缩液，精密称定总重，置25m1量瓶中，加甲醇定容，超声处理，放冷至室温，补加甲醇定容，摇匀，高速离心，取上清液为供试品溶液； 

（4）液相色谱仪测定:将混合对照品溶液稀释，注入液相色谱仪进行测定，用外标法测定5种组分的含量；