[发明专利]一种空肠弯曲菌快速检测试剂盒在审
申请号: | 201310372710.2 | 申请日: | 2013-08-23 |
公开(公告)号: | CN104419750A | 公开(公告)日: | 2015-03-18 |
发明(设计)人: | 刘代新;潘海云 | 申请(专利权)人: | 上海同科生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200092 上海市杨浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 空肠 弯曲 快速 检测 试剂盒 | ||
1.一种用于检测空肠弯曲菌DNA存在的快速荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:
由DNA提取液、PCR反应预混液、热启动Taq 酶、阳性标准品和阴性质控品组成;所述的DNA是脱氧核糖核酸,所述的PCR是聚合酶链式反应,所述的Taq酶是一种耐热的DNA聚合酶。
2.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒,其特征是:PCR反应预混液包括PCR反应缓冲成分(50mM KCl,10mM Tris-HCl ,pH 8.5),各400μmol/L的上游引物hipO-1和下游引物hipO-2,200μmol/L荧光探针hipO-3,5mmol/L的MgCl2,4mmol/L的dNTPs(dATP,dGTP,dCTP和dTTP等体积混合物)和无菌双蒸水;
hipO-1序列为:5'- CCTCACTAGCAAAATCCACAGCTT- 3',
hipO-2序列为:5'- TGCACAGGCTAATGATATAGRGATTA- 3'(R=A/G),
hipO-3序列为:5'- TATTCATAGTCACTGGTGCAAC- 3',其中5'标记FAM基团,3'标记MGB基团。
3.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒,其特征是:
阳性标准品是空肠弯曲菌特异性马尿酸酶(hippurate hydrolase ,hipO)基因中部分核酸片段连接到T载体上构建的质粒,核酸片段的序列为:
CCTCACTAGCAAAATCCACAGCTTCATCGTTATTCATAGTCACTGGTGCAACAACATTTTTATTGATTTTAATCCCTATATCATTAGCCTGTGCA。
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