[发明专利]一种空肠弯曲菌快速检测试剂盒在审

专利信息
申请号: 201310372710.2 申请日: 2013-08-23
公开(公告)号: CN104419750A 公开(公告)日: 2015-03-18
发明(设计)人: 刘代新;潘海云 申请(专利权)人: 上海同科生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 200092 上海市杨浦*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 空肠 弯曲 快速 检测 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种用于检测空肠弯曲菌DNA存在的快速荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:

由DNA提取液、PCR反应预混液、热启动Taq 酶、阳性标准品和阴性质控品组成;所述的DNA是脱氧核糖核酸,所述的PCR是聚合酶链式反应,所述的Taq酶是一种耐热的DNA聚合酶。

2.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒,其特征是:PCR反应预混液包括PCR反应缓冲成分(50mM KCl,10mM Tris-HCl ,pH 8.5),各400μmol/L的上游引物hipO-1和下游引物hipO-2,200μmol/L荧光探针hipO-3,5mmol/L的MgCl2,4mmol/L的dNTPs(dATP,dGTP,dCTP和dTTP等体积混合物)和无菌双蒸水;

hipO-1序列为:5'- CCTCACTAGCAAAATCCACAGCTT- 3',

hipO-2序列为:5'- TGCACAGGCTAATGATATAGRGATTA- 3'(R=A/G),

hipO-3序列为:5'- TATTCATAGTCACTGGTGCAAC- 3',其中5'标记FAM基团,3'标记MGB基团。

3.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒,其特征是:

阳性标准品是空肠弯曲菌特异性马尿酸酶(hippurate hydrolase ,hipO)基因中部分核酸片段连接到T载体上构建的质粒,核酸片段的序列为:

CCTCACTAGCAAAATCCACAGCTTCATCGTTATTCATAGTCACTGGTGCAACAACATTTTTATTGATTTTAATCCCTATATCATTAGCCTGTGCA。

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