[发明专利]一种具有致痒作用的芋蛋白提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有致痒作用的芋蛋白提取物，其特征在于，它的氨基酸序列为：

Ser-Gln-Leu-Asn-Phe-Tyr-Gln-Gly-Lys-Gly-Gln-Gly-Asn-Phe-Leu-Val-Ala-Val-Asp。

2.权利要求1所述的具有致痒作用的芋蛋白提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将新鲜的芋头切块，加1～3倍水后，匀浆机粉碎，按固液比为1:3～1:8加入乙醇，搅拌浸泡1～6小时，过滤，滤渣常温下挥干乙醇后，按固液比为1:3～1:8加水，匀浆机粉碎，纱布过滤，得到滤液；

(2)取步骤(1)滤液用超滤系统进行分级，所用滤膜截留分子量分别为3000Da和10000Da，分别得到小于3000Da、3000-10000Da和大于10000Da三个分子量段的芋头蛋白粗提液，使用钙离子成像实验检测致痒活性，得到分子量段为3000-10000Da具有致痒活性的提取物；

(3)取步骤(2)所得的具有致痒活性的提取物于0～10℃，转速1000～8000rpm下进行离心分离，取上清液，经离子交换柱层析，柱层析填料为强阴离子交换树脂，用水与NaCl溶液为流动相，梯度洗脱，用钙离子成像实验检测致痒活性，收集有致痒活性的组分；

(4)取步骤(3)得到的有致痒活性的组分，上凝胶柱色谱柱，用水洗脱进行脱色除杂，再经超滤或透析除盐，然后浓缩、冷冻干燥，得具有致痒作用的芋蛋白提取物。

3.根据权利要求2所述的具有致痒作用的芋蛋白提取物的制备方法，其特征在于，步骤(3)离子交换柱层析的洗脱液为水和1mol/L NaCl，梯度洗脱程序为：

0～20min，5%～60%体积比的1mol/L NaCl；

20～30min，60%～100%体积比的1mol/L NaCl。

4.根据权利要求2所述的具有致痒作用的芋蛋白提取物的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述的超滤或透析除盐的膜透过分子量小于等于1KD。

5.权利要求1所述的具有致痒作用的芋蛋白提取物在制备致痒模型工具药物中的应用。