[发明专利]一种制备重组柯萨奇病毒A16型病毒样颗粒的方法

权利要求书

1.一种表达柯萨奇病毒A组16型病毒样颗粒的真核表达载体，含有分别位于两个开放阅读框内的P1蛋白表达序列和3C蛋白表达序列。

2.如权利要求1所述的真核表达载体，其特征在于，所述P1蛋白表达序列如SEQ ID NO：3所示；所述3C蛋白表达序列如SEQ ID NO：4所示。

3.如权利要求1所述的真核表达载体，其特征在于，所述P1蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO：1所示；所述3C蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

4.如权利要求1所述的真核表达载体，其特征在于，所述P1蛋白的表达受MOX启动子调控；所述3C蛋白的表达受DAS启动子调控。

5.如权利要求4所述的真核表达载体，其特征在于，所述DAS启动子的序列如SEQ ID NO：5所示；所述MOX启动子的序列如SEQ ID NO：6所示。

6.一种柯萨奇病毒A组16型病毒样颗粒的表达系统，包括酵母细胞以及位于酵母细胞内的权利要求1-5任一权利要求所述表达柯萨奇病毒A组16型病毒样颗粒的真核表达载体。

7.如权利要求6所述的表达系统，其特征在于，所述酵母选自酿酒酵母、多形汉逊酵母、巴斯德毕赤酵母、脆壁克鲁维氏酵母、乳酸克鲁维氏酵母，以及栗酒裂殖酵母中的任一种。

8.一种制备柯萨奇病毒A组16型病毒样颗粒的方法，为首先构建P1蛋白受MOX启动子调控表达，并且3C蛋白受DAS启动子调控表达的真核表达载体，然后通过酵母表达系统进行表达，获得柯萨奇病毒CA16型病毒颗粒。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述P1蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述3C蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

10.权利要求1-5任一权利要求所述的真核表达载体、权利要求6-7任一权利要求所述的表达系统，以及权利要求8-9任一权利要求所述的制备方法在制备手足口病疫苗中的应用。