[发明专利]应用于小麦成熟胚培养的干胚游离方法有效
| 申请号： | 201310364141.7 | 申请日： | 2013-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN103436484A | 公开（公告）日： | 2013-12-11 |
| 发明（设计）人： | 解超杰;孙其信;倪中福;梁荣奇;李映辉;沈红霞;彭福祥;宋娜;耿妙苗 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04;A01H4/00;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 应用于 小麦 成熟 培养 游离 方法 | ||
1.一种禾本科植物的取胚方法，包括如下步骤：将禾本科植物的籽粒打碎，先过9目网筛去除大颗粒，再过30目网筛去除小颗粒，从粒度介于9目筛和30目筛之间的颗粒中挑取1-2mm的胚组织。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述禾本科植物为小麦。
3.权利要求1所述方法在制备禾本科植物的愈伤组织中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述禾本科植物为小麦。
5.一种制备禾本科植物的愈伤组织的方法，包括如下步骤：
（1）将禾本科植物的籽粒打碎，先过9目网筛去除大颗粒，再过30目网筛去除小颗粒，从粒度介于9目筛和30目筛之间的颗粒中挑取胚组织；
（2）将步骤（1）得到的胚组织用水洗涤，然后用2.5g/100ml次氯酸钠水溶液消毒1分钟，然后用水洗涤；
（3）将权利要求（2）得到的胚组织接种至诱导培养基并进行暗培养，得到愈伤组织。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述禾本科植物为小麦。
7.权利要求1所述方法在禾本科植物的遗传转化中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于：所述禾本科植物为小麦。
9.一种制备转基因禾本科植物的方法，包括如下步骤：
（1）将禾本科植物的籽粒打碎，先过9目网筛去除大颗粒，再过30目网筛去除小颗粒，从粒度介于9目筛和30目筛之间的颗粒中挑取胚组织；
（2）将步骤（1）得到的胚组织用水洗涤，然后用2.5g/100ml次氯酸钠水溶液消毒1分钟，然后用水洗涤；
（3）将权利要求（2）得到的胚组织进行愈伤诱导培养，得到愈伤组织；
（4）将步骤（3）得到的愈伤组织进行高渗培养，然后用基因枪轰击携带目的基因的重组表达载体，然后进行恢复培养；
（5）取完成步骤（4）的愈伤组织，采用0.75mg/L草甘膦进行筛选培养，然后在0.75mg/L草甘膦浓度下进行分化培养；
（6）取步骤（5）得到的再生苗，在0.75mg/L草甘膦浓度下进行生根壮苗培养。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于：所述禾本科植物为小麦。
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