[发明专利]猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测引物及试剂无效
| 申请号： | 201310353373.2 | 申请日： | 2013-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN103397109A | 公开（公告）日： | 2013-11-20 |
| 发明（设计）人： | 曲哲会;郭晓秋;刘涛;唐雪峰;张广强 | 申请（专利权）人： | 曲哲会 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 | 代理人： | 聂孟民 |
| 地址： | 464000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 猪瘟 病毒 繁殖 呼吸 综合征 多重 rt pcr 检测 引物 试剂 | ||
1.一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测引物，其特征在于，包括引物对C1/C2和P1/P2，引物对C1/C2包括引物C1和引物C2，引物对P1/P2包括引物P1和引物P2，引物C1、引物C2 、引物P1和引物P2的核苷酸序列分别为序列表的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4。
2.根据权利要求1所述的猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测引物，其特征在于，所述的引物对C1/C2和P1/P2在对CSFV细胞毒、PRRSV细胞毒和HP-PRRSV细胞毒基因组RNA进行RT-PCR扩增后得到CSFV PCR产物294bp SEQ ID NO:7、PRRSV PCR产物536bp SEQ ID NO:5和HP-PRRSV PCR产物452bp SEQ ID NO:6。
3.一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测试剂，其特征在于，包括反转录体系试剂和PCR体系试剂，所述的反转录体系试剂包括待测RNA模板、引物C2、引物P2、dNTP mixture、RNA酶抑制剂、M-MLV反转录酶和5×M-MLV buffer；所述的引物C2和P2在反转录体系试剂中均为2μL；所述的RNA酶抑制剂在反转录体系试剂中为1μL；所述的dNTP mixture在反转录体系试剂中为5 μL；所述的M-MLV反转录酶和5×M-MLV buffer在反转录体系试剂中分别为1μL和5μL；
所述的PCR体系试剂包括反转录体系试剂、引物对C1/C2和P1/P2、rTaq DNA 聚合酶、dNTP mixture和10×PCR buffer；所述的引物对C1/C2和P1/P2在PCR体系试剂中分别为0.25μL；所述的dNTP mixture在PCR体系试剂中为2 μL；所述的rTaq DNA聚合酶和10×PCR buffer在PCR体系试剂中分别0.25 μL和2.5μL。
4.一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测引物对C1/C2和P1/P2在猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR检测试剂中的应用。
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