[发明专利]一种纯化DNA的方法有效
申请号: | 201310350182.0 | 申请日: | 2013-08-12 |
公开(公告)号: | CN103408625A | 公开(公告)日: | 2013-11-27 |
发明(设计)人: | 惠长野;杨径;张文;杨学琴;黄先青;高朝贤;李智民;李丽梅;王佃鹏 | 申请(专利权)人: | 深圳市职业病防治院 |
主分类号: | C07H21/04 | 分类号: | C07H21/04;C07H1/06 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 518001 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯化 dna 方法 | ||
1.一种从粗品DNA中精制DNA的方法,包括如下步骤:
(1)取粗品DNA,用水溶解并调pH至2.5-5.0,得到质量百分含量为0.5-6.0g/100mL的DNA溶液;
(2)将步骤(1)得到的DNA溶液上样于阳离子交换树脂柱并收集流出液;
(3)取步骤(2)得到的流出液,加入无机钠盐并使其浓度为0.5-1.5mol/L,调pH至6.5-7.5;
(4)取步骤(3)得到的溶液,加入等体积的无水乙醇以沉淀DNA;
(5)将步骤(4)得到的DNA沉淀烘干,然后用水溶解,得到质量百分含量为1.0-6.0g/100mL的DNA溶液;
(6)将步骤(5)得到的DNA溶液进行干燥,得到DNA精制品。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)中,采用40-70℃搅拌的方式促进所述粗品DNA的溶解。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)中,所述pH为3.0。
4.如权利要求1至3中任一所述的方法,其特征在于:所述步骤(2)中,所述阳离子交换树脂为氢型阳离子交换树脂或钠型阳离子交换树脂,优选钠型强阳离子交换树脂,更加优选为Amberlite IR-120钠型强阳离子交换树脂。
5.如权利要求1至4中任一所述的方法,其特征在于:所述步骤(3)中,所述无机钠盐为醋酸钠。
6.如权利要求1至5中任一所述的方法,其特征在于:所述步骤(3)中,所述无机钠盐的浓度为1.0mol/L。
7.如权利要求1至6中任一所述的方法,其特征在于:所述步骤(3)中,所述pH为6.8。
8.如权利要求1至7中任一所述的方法,其特征在于:所述步骤(4)中,沉淀DNA的条件为室温静置8小时。
9.如权利要求1至8中任一所述的方法,其特征在于:所述步骤(6)中,所述干燥的方法为冷冻干燥或喷雾干燥。
10.如权利要求1至9中任一所述的方法,其特征在于:所述粗品DNA为DNA纯度低于95%的DNA产品。
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