[发明专利]从紫红獐牙菜中分离的口山酮类及抑制乙型肝炎病毒的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物口山酮类化合物，尤其涉及从紫红獐牙菜（Swertia punicea Hemsl.）中分离的口山酮类单体化合物，本发明进一步涉及它们在制备抗乙肝病毒HBsAg或HBeAg表达、保护肝细胞或修复损伤肝细胞或制备用于生物标记物或诊断试剂中的用途，属于生物口山酮类化合物及其应用领域。 

背景技术

肝脏是人体的中心代谢器官，肝炎是肝脏的炎症，作为一种高发性传播疾病，肝炎已经已经严重威胁我们的身体健康和日常生活，肝炎种类很多，不同的原因导致不同的肝炎。肝炎根据病因来分，可以分为病毒性肝炎、药物性肝炎、酒精性肝炎、中毒性肝炎等。 

中国是一个肝炎大国，病毒性肝炎发病数位居法定管理传染病的第一位，仅慢性乙型肝炎病毒感染者就达1.2亿。慢性乙型肝炎病程迁延，如得不到及时的治疗，将会发展为肝硬化甚至肝癌，严重危害人类健康。 

同时在药物使用过程中，因药物本身或/及其代谢产物或由于特殊体质对药物的超敏感性或耐受性降低亦会导致肝脏损伤，即药物性肝损伤，临床上可表现为各种急慢性肝病，轻者停药后可自行恢复，重者可能危及生命、需积极治疗、抢救。同时，由药物引起的肝病占非病毒性肝病中的20%-50%，暴发性肝衰竭的15%-30%。多种药物可以引起药物性肝损伤，如抗肿瘤的化疗药、抗结核药、解热镇痛药、免疫抑制剂、降糖降脂药、抗细菌、抗真菌及抗病毒药等。 

对乙酰氨基酚（APAP）是全球应用最广泛的解热镇痛药物之一，虽然其推荐治疗剂量安全有效，但治疗窗较窄。APAP的应用已成为西方国家发生药物性肝损伤的主要原因，在美国、英国和澳大利亚，APAP是导致急性肝功能衰竭的主要原因（在美国，超过50%的急性肝功能衰竭由APAP所致）。临床医师应警惕APAP潜在危险，尤其在长期饮酒、有肝脏基础疾病的患者中，更应谨慎。 

APAP导致的药物性肝损伤是一个复杂的过程。目前认为，当过量服用APAP后，在细胞色素P450（CYP）作用下，APAP转化为N-乙酰-对-苯醌亚胺（NAPQI），导致谷胱甘肽耗竭及与蛋白质的共价结合，继而导致自由基（包括氧自由基和氮自由基）增加。氧化应激增加可能与钙离子有关，继而启动信号转导途径和线粒体膜通透性的转换。线粒体膜通透性转换导致进 一步的氧化应激反应，线粒体膜电位下降，腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）合成障碍，ATP耗竭，继而引起细胞坏死。谷胱甘肽可阻断APAP所导致的肝细胞坏死。 

中国是资源丰富的中药大国，近年来报道许多中药及其有效成分均有肝细胞保护作用，研究这些中药及其有效成分，开发出改善肝炎的新药将会有广阔的应用前景。 

紫红獐牙菜（Swertia punicea Hemsl.）系龙胆科獐牙菜属一年生草本植物，又名水黄莲、土黄莲（湖南）、苦胆草、草龙胆、桑蒂（藏药）、布什都补此（彝族），分布于云南、四川、贵州、湖北西部、湖南。生于山坡草地、河滩、林下、灌丛中，海拔400-3800米。紫红獐芽菜以全草入药，该药味苦性寒，具有清肝利胆、清热解毒、祛湿健胃之功效。尽管目前治疗肝炎的药物较多，然而能够达到令人满意疗效的药物较少。《中国药典》中的保肝药青叶胆资源已日趋枯竭，难于满足生产需要。从紫红獐牙菜中分离获得具有确切的保肝、护肝药理活性的单体化合物，这对于肝炎的预防或治疗将具有重要意义。 

发明内容

本发明的目的之一是提供一类从紫红獐牙菜（Swertia punicea Hemsl.）中分离的具有确切的抗乙肝病毒HBsAg和/或HBeAg表达，保肝、护肝药理活性的口山酮类单体化合物； 

本发明的目的之二是提供一种从紫红獐牙菜（Swertia punicea Hemsl.）中分离所述口山酮类单体化合物的方法； 

本发明的目的之三是将所述的口山酮类单体化合物应用于抑制乙型肝炎病毒HBsAg和/或HBeAg表达、保护肝细胞或修复损伤肝细胞； 

本发明的目的之四是提供一种预防或治疗乙型肝炎或保肝、护肝的药物组合物。 

本发明的目的之五是提供一种可用于制备生物标记物或诊断试剂的小分子偶联物，所述生物标记物包括量子点生物荧光探针及其他荧光或非荧光探针偶联物。 

本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：