[发明专利]一种体外诱导脂肪源性干细胞分化为雪旺细胞的方法无效
| 申请号: | 201310344668.3 | 申请日: | 2013-08-07 |
| 公开(公告)号: | CN103484430A | 公开(公告)日: | 2014-01-01 |
| 发明(设计)人: | 张自强;刘玉梅;吕琼霞;陈晓光;邓雯;秦燕;武花;张春燕 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
| 主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;C12N5/0775 |
| 代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
| 地址: | 471003 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 体外 诱导 脂肪 干细胞 化为 细胞 方法 | ||
1.一种体外诱导脂肪源性干细胞分化为雪旺细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)体外分离脂肪源性干细胞,用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养;
2)取传代至第3-5代的脂肪源性干细胞,消化,收集细胞;
3)将收集的细胞放入含10%胎牛血清的DMEM培养基培养,待其长至70-80%融合时,加入外周神经浸出液诱导;
4)诱导1-5d,脂肪源性干细胞分化为雪旺细胞。
2.根据权利要求1所述的一种体外诱导脂肪源性干细胞分化为雪旺细胞的方法,其特征在于,所述外周神经浸出液的制备方法包括以下步骤:
取3-4周龄大鼠坐骨神经,剪碎成1-3cm的碎片,放入含10%胎牛血清的DMEM培养基中,在﹣20-4℃条件下保存2-5d,过40-200μm细胞滤网,所得滤液即为外周神经浸出液。
3.根据权利要求1所述的一种体外诱导脂肪源性干细胞分化为雪旺细胞的方法,其特征在于,所述外周神经浸出液的加入量为每75cm2细胞生长面积加入8-12mL外周神经浸出液。
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