[发明专利]同色兜兰的杂交育种及其种苗繁殖方法

说明书

技术领域

本发明属于植物育种领域，具体涉及一种利用同色兜兰为亲本的杂交育种及其种苗繁殖方法。

背景技术

同色兜兰[Paphiopedilum concolor（Bateman）Pfitz.]是兰科（Orchidaceae）兜兰属植物，主要分布于我国广西西部、贵州南部、云南东南部至西南部，柬埔寨、老挝、缅甸、泰国、越南等国也有分布。同色兜兰花型奇特，花色艳丽，是一种非常珍贵的观赏植物。与其他兜兰属植物一样，由于生境破坏和过度采挖，同色兜兰已濒临灭绝，属于“野生动植物濒危物种国际贸易公约”（Convention on International Trade in Endangered species of Wild Fauna and Flora，CITES）附录Ⅰ中的保护对象而被禁止贸易。

兜兰属植物杂交种比原生种花型花姿更为优美，花色更为丰富艳丽，其抗逆性也更强。在国际市场上，以兜兰为亲本的杂交花卉深受人们的喜爱，已成为世界兰花产业的一大支柱，取得了巨大的经济效益。同色兜兰具有很高的杂交亲和性，是一种重要的杂交亲本。据“国际散氏兰花种杂种登记目录”（Sarder’s list of orchid hybrids）记载，截至2012年4月1日，以同色兜兰为亲本已有142个杂交种被登录，但我国同色兜兰的杂交育种工作才刚刚起步。因此，利用我国丰富的兰科植物资源，进行同色兜兰的杂交育种不仅优势明显而且很有意义。

此外，同色兜兰虽具有很高的杂交亲和性，但由于其杂交种子无胚乳或胚发育不完全，在自然状态下萌发率极低，而利用生物技术可以有效提高萌发率并达到快速生产种苗的目的。

发明内容

本发明的目的是提供一种同色兜兰的杂交育种方法和杂交种子萌发率高、成苗快、种苗品质好的繁殖方法。

本发明选择具明显特性、观赏价值高、适应性强的兜兰植物作为杂交亲本，进行杂交。当授粉成功得到的果实生长到150~180天时，蒴果充分膨大，果皮由浓绿开始转黄时，将种子播种在萌发培养基上进行萌发，种子萌发后形成的原球茎转入幼苗分化培养基上使其分化形成小苗，小苗再转移到壮苗培养基上培养，形成的试管苗经过自然光照下练苗7~10天后出瓶栽培，成苗的移栽成活率可达80~95%，从而实现了本发明的目的。

本发明一种同色兜兰的杂交育种及种苗繁殖方法，包括以下具体步骤:

（1）人工授粉：将不同种类的野生兜兰植株引种种植在人工资源圃中，选同色兜兰作为亲本之一，与其它兜兰属植物互为父、母本进行杂交，在花朵开放4~10天，花粉块开始由硬变软时，采集父本的花粉人工授于母本的柱头上，两个亲本互为父、母本进行正反交,并进行套袋处理，防止外来花粉的干扰，5天后去除套袋，杂交结实率50~85%；

（2）种子成熟度的选择：采集不同生长天数的种子进行萌发试验，其中以人工授粉后生长150~180天，蒴果充分膨大，果皮由浓绿开始转黄时的果实种子为最佳材料；

（3）种子萌发形成原球茎：当母本结出的杂交果实发育到150~180天时，整果剪下先用自来水清洗干净，然后依次用体积分数为70~75%酒精溶液浸泡1~2分钟后，用质量分数为0.1~0.2%的升汞溶液浸泡消毒15~20分钟，再用无菌水冲洗4~5次，用无菌滤纸吸干果实表面的水分，纵向切开果实，将种子接种到萌发培养基上，在温度25~28℃的黑暗条件下，培养20天时种子开始膨大形成无色透明的或白色的原球茎，30~50天达到萌发高峰，种子萌发率60~90%；所述种子萌发培养基含：1/2~1/6MS、BA1.0~2.0 mg L^-1、NAA0.1~1.0 mg L^-1、椰子汁100~200 ml L^-1、活性炭1.0~2.0 g L^-1、蔗糖20~30 g L^-1、琼脂4.5~5.5 g L^-1、pH为5.0~5.5；